[发明专利]一种亲和层析纯化乌司他丁的方法

权利要求书

1.一种纯化乌司他丁的方法，该方法包括：将乌司他丁粗品通过离子交换层析、超滤液沉淀、沉淀物冻干步骤进行纯化，所得纯化后的乌司他丁的总收率提高到70%以上，总效价不低于5000iu/mg。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述乌司他丁粗品是通过以男性尿液为原料，将原料依次经过甲壳质吸附、氨水洗脱、硫酸铵盐析制备得到的。

3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述吸附柱层析包括如下步骤：

（1）用洗脱液A溶解乌司他丁粗品，搅拌、离心，留取离心液，所述洗脱液A为0.01-0.3moL/L的醋酸盐缓冲液；

（2）用洗脱液B平衡吸附柱，将上述离心液上柱，洗脱液B为0.01-0.5moL/L醋酸钠和0.1-5moL/L NaCl的缓冲液；

（3）用洗脱液B洗脱吸附柱，收集洗脱液；

（4）用洗脱液C平衡亲和层析柱，将超滤液上柱，洗脱液C为0.01-0.5moL/L甘氨酸和0.1-5moL/L NaCl的缓冲液；

（5）上样结束后，用洗脱液C洗脱，收集洗脱液；

（6）柱中的亲和树脂经洗脱液C   洗脱后，用洗脱液 D洗涤去除吸附在上面的杂质，密封待用，洗脱液D为0.01-0.3moL/L盐酸和0.1-5moL/L NaCl的缓冲液；

（7）将洗脱液经超滤膜，加入磷酸盐缓冲液反复超滤，得超滤液。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述磷酸盐缓冲液的浓度为0.01-0.5moL/L。

5.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述吸附柱为阴离子交换柱。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述阴离子交换柱包括：强阴离子交换柱Q-Sephadex A-25,Q-Sephadex A-50,Q-Sephadex C-25,Q-Sephadex C-50；弱阴离子交换柱DEAE-Cellulose DE-22，DEAE-Cellulose DE-23，DEAE-Cellulose DE-51，DEAE-Cellulose DE-52，DEAE-Cellulose DE-53。

7.如权利要求7所述的方法，其特征在于：所述亲和层析柱包括：CM-Sephadex A-25,CM-Sephadex A-50,CM-Sephadex C-25,CM-Sephadex C-50，SP-Sepharose 2B,SP-Sepharose 4B,SP-Sepharose 6B，SP-Sepharose CL-2B,SP-Sepharose CL-4B,SP-Sepharose CL-6B。

8.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述超滤液沉淀步骤包括：超滤液中加入乙醇沉淀。