[发明专利]一种金色链霉菌发酵生产金霉素的新型培养基和培养方法

说明书

技术领域

本发明属于发酵技术领域，特别是涉及一种金色链霉菌发酵生产金霉素的新型培养基和培养方法。

背景技术

金霉素属四环类抗生素，具有广谱抗菌作用，其抗菌谱与四环素相似，对多数革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有抗菌作用。此外，它们还能抑制立克次氏体和砂眼病毒及淋巴肉芽肿病毒。

目前，国内金霉素的发酵生产采用二级或三级模式，该方式存在的主要问题有以下几点：

1 国内部分厂家采用三级发酵模式生产金霉素，生产工序较为繁琐。

2 金霉素发酵水平较低，一般控制在25000～30000u/ml。

3 金霉素种子培养和发酵培养周期较长。其中，种子培养周期25～30h，发酵周期控制在110～115h。

4 金霉素发酵成本较高，体现在以下几点：首先原材料采购成本较高。金霉素培养基中常用的有机氮源主要是花生饼粉（或黄豆饼粉）、蛋白胨、酵母粉，其市场价格较高；其次，采用三级发酵模式生产金霉素，用水量大，能耗较高。

发明内容

本发明的目的就在于克服上述现有技术的缺陷，提供一种发酵工艺简单，有效提高发酵单位，同时最大限度的降低原辅料对发酵单位的影响，降低生产成本，且原辅料来源不受环境影响，保证其供应充足，实现金霉素稳定、高效生产的金色链霉菌发酵生产金霉素的新型培养基。

本发明的另一目的是提供利用上述培养基生产金霉素的培养方法。

为实现上述目的所采取的技术方案为：

一种金色链霉菌发酵生产金霉素的新型培养基，包括种子培养基和发酵培养基组成，其特征在于所述种子培养基和发酵培养基中均含有土霉素菌渣。

所述土霉素菌渣来源于土霉素发酵液经板框过滤得到的固体产物，质量要求为：氨基氮含量≥20%；水分≤6%；灰分≤5%；碳水化合物≥10%；干渣颗粒通过60目筛的数量≥85%。

所述种子培养基组成为：乳清粉6～10g/L、麦芽糊精9～12g/L、低温黄豆饼粉6～9g/L、玉米浆8～10ml/L、土霉素菌渣10～15g/L、硫酸铵1～3g/L、轻质碳酸钙1～3g/L、磷酸二氢钾0.5～1.5g/L，玉米油5～10ml/L。

所述发酵培养基组成为：乳清粉8～12g/L、麦芽糊精12～15g/L、低温黄豆饼粉8～12g/L、玉米浆9～13ml/L、土霉素菌渣15～20g/L、硫酸铵1～3g/L、轻质碳酸钙1～3g/L、磷酸二氢钾0.5～1.5g/L、玉米油10～15ml/L、氯化钠0.9～1.1g/L、硫酸镁0.4～0.8g/L、硫酸亚铁0.2～0.5g/L。

利用上述培养基发酵生产金霉素的培养方法，其特征在于其工艺步骤为：

1） 采用平行种子发酵模式进行种子培养：首先将种子培养基灭菌，冷却，并用无菌空气保压，然后在火焰保护下，将已经培养好的金色链霉菌母瓶发酵液接入种子罐进行培养，接种量控制在种子培养基体积的0.1～0.2％；

2） 发酵培养：先将发酵培养基灭菌，冷却，并用无菌空气保压，然后将采用平行种子发酵模式培养的种子液移入发酵罐进行发酵培养。 

所述种子培养条件为：罐压0.05～0.06MPa；罐温31～33℃；空气流量：0～12h，20～30m³/h；12h～移种：50～60m³/h；搅拌转速80～100r/min。

所述发酵培养条件为：

a 培养基初始pH：发酵培养基灭菌后pH控制在6～7；

b 温度：采用变温控制方法，0～20h：培养温度29～31℃；20h～发酵结束：培养温度31～33℃；

c 搅拌转速：100～130r/min；

d 压力控制：罐压0.05～0.06MPa；

e pH控制：发酵过程中pH控制在5.5～6.5；

f 无菌检查：发酵过程中进行菌检，要求无其它杂菌；

g 空气流量：0～20h：150～200m³/h；20h～发酵结束：250～300m³/h；

h 溶氧控制：

发酵前5h内，不控制溶氧；

6～20h，溶氧控制在80%以上；

21～60h，溶氧控制在20%以上；

61～发酵结束：溶氧控制在40%以上。

所述种子培养过程中的移种条件为：种子培养结束，其菌体浓度15～25%；pH值5.5～6.5；无其它杂菌污染；培养时间15～18h。

发酵培养停止条件为：