[发明专利]红肉桃果实中花色苷的提取和高效液相测定方法有效
申请号: | 201410052704.3 | 申请日: | 2014-02-17 |
公开(公告)号: | CN103760289A | 公开(公告)日: | 2014-04-30 |
发明(设计)人: | 严娟;沈志军;蔡志翔;俞明亮;马瑞娟;钱巍 | 申请(专利权)人: | 江苏省农业科学院 |
主分类号: | G01N30/88 | 分类号: | G01N30/88 |
代理公司: | 北京市京大律师事务所 11321 | 代理人: | 方晓明 |
地址: | 211001 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 红肉桃 果实 花色 提取 高效 测定 方法 | ||
1.一种红肉桃果实中花色苷的提取和高效液相测定方法,其步骤包括:
a 、配制花色苷的混合标准溶液,在色谱条件下高效液相色谱分析绘制标准溶液曲线,
其中色谱条件为:
色谱柱:C18反相柱;
流动相A:甲醇:磷酸:三氟乙酸=97:2:1(V/V);
流动相B:水:磷酸:三氟乙酸=97:2:1(V/V);
流速:1.0 ml/min;
波长:525 nm;
柱温:25℃;
梯度冲洗:0~17 min,流动相B从95-44%;17~20 min,流动相B从44-95%;
b、称取1g桃果肉,加入5mg果胶酶和5mg纤维素酶,同时加入2 ml提取液,避光超声波提取10 min,4℃下10000 rpm离心10 min,取上清液经0.22 mm有机滤头过滤,即配制成样品溶液,其中提取液的配比为甲醇:水:磷酸:三氟乙酸=70:27:2:1(V/V);
c、在色谱条件下对样品溶液进行高效液相色谱分析,色谱条件同步骤a;
d、将样品溶液的分析结果与标准溶液曲线做比对,得出样品溶液中的花色苷含量。
2.根据权利要求1所述的红肉桃果实中花色苷的提取和高效液相测定方法,其特征在于:步骤a中配制花色苷的混合标准溶液的步骤为:分别准确称取1 mg各种花色苷标准品,用1 ml提取液溶解,制得浓度为1000 mg/L的标准溶液;分别移取0.50 ml各标准溶液,混合并用提取液逐级稀释,制得各级混合标准溶液,各级混合标准溶液浓度分别为500、100 、50、10、5、1、0.5、0.1、0.05、0.01mg/L。
3.根据权利要求1或2所述的红肉桃果实中花色苷的提取和高效液相测定方法,其特征在于:所述花色苷包括矢车菊素 3-葡萄糖苷和矢车菊素 3-芸香糖苷。
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