[发明专利]一种兔病毒性出血症病毒重组亚单位疫苗及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种兔病毒性出血症病毒重组亚单位疫苗及其制备方法。该疫苗是一种应用昆虫杆状病毒表达系统生产的具有抗兔病毒性出血症作用的重组亚单位疫苗，属于兽用生物制品及生物技术领域。

背景技术

兔出血性疾病（Rabbit hemorrhagic disease,RHD）是一种具有高度传染性和致死性的疾病，宿主包括野生兔和家兔，已经成为野兔生存和家兔衍生产业发展的一个重大威胁。

RHDV（Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV）是引发RHD的病毒，该病毒是一个无囊膜病毒，属杯状病毒科家族（V F Ohlinger,B Haas,G Meyers,F Weiland and H J Thiel.Identification and characterization of the virus causing rabbit hemorrhagic disease.Journal of Virology.1990(64)3331-3336；F Parra and M Prieto.Purification and characterization of a calicivirus as the causative agent of a lethal hemorrhagic disease in rabbits..Journal of Virology.1990(64)4013-4015）。RHDV颗粒由一个7.5kb的单链正向RNA基因组组成，其缠绕在一个直径约38nm的二十面体小衣壳上。RHDV衣壳蛋白（VP60）约为60kD。天然的病毒衣壳由180个VP60组成（J Barcena,N Verdaguer,R Roca,M Morales,I Angulo,C Risco,J L Carrascosa,J M Torres,J R Caston.The coat protein of Rabbit hemorrhagic disease virus contains a molecular switch at the N-terminal region facing the inner surface of the capsid.Virology.2004(322)118–134.）。

RHDV于1984年第一次在中国发现。几年之内，蔓延到韩国和欧洲大陆（S Mitro,H Krauss.Rabbit hemorrhagic disease:A review with special reference to its epizootiology.1993(9)70-78）。随后在大洋洲，北非，中东，俄罗斯，印度，古巴，美国和墨西哥以及乌拉圭爆发（A Bouslama,G M De Mia,S Hammami,T Aouina,H Soussi,T Frescura.Identication of the virus of rabbit haemorrhagic disease in Tunisia.Veterinary Research 1996(138)108-110.）。1989年，国际兽医局（OIE）将该病正式列为B类传染病，我国将其列为二类传染病。通常情况下，RHD在感染后48h～72h发作，通过急性肝损伤和弥漫性血管内凝血导致80%的成年动物死亡（J M Martín-Alonso,P García Palencia,et al.Macrophage tropism of rabbit hemorrhagic disease virus is associated with vascular pathology.Virus research.1999(60)21-28）。这种疾病具有高度的传染性，病毒能通过口腔、鼻腔或结膜方式传播。幸存的动物甚至可在病毒感染后4周内持续释放病毒。RHDV病毒能够抵抗多种极端环境，包括低pH、高温和反复冻融，使其能够在自然环境中保持稳定（S R Moss,S L Turner,R C Trout,P J White,P J Hudson,A Desai,M Armesto,N L Forrester,E A.Gould Molecular epidemiology of Rabbit haemorrhagic disease virus.Journal of Genetic Virology.2002(83)2461-2467）。