[发明专利]蚕虫草(活性物质)虫草素的提取工艺

说明书

技术领域

本发明涉及中药领域，涉及一种中药活性物质的提取工艺。

背景技术

北冬虫夏草(Cordyc epsmilitaris)亦称北虫草或蛹虫草，是一种国内外公认的既可食用又可药用的真菌，是寄生于夜蛾科等蛹体上的不同于冬虫夏草的另一种虫草。目前北虫草一般采用蚕蛹作寄主或大米等作培养基进行培养。国家卫生部已于2009年3月批准蛹虫草为新资源食品。蚕虫草也称桑蚕虫草或家蚕虫草，是用野生天然蛹虫草(Cordyceps militaris)菌株孢子接种到5龄桑蚕上人工培育而成的虫菌结合体。

研究已证实，蚕虫草与蚕蛹草相比，虫草酸相近，虫草多糖是蚕蛹草的2.5倍，虫草素则为其4倍，只有腺苷是其1／2；蚕虫草与冬虫夏草相比，虫草素是冬虫夏草的数百倍，腺苷也为其4倍，而虫草多糖和腺苷则是它的1／2左右。以上比较结果说明，蚕虫草的活性成分含量优于蚕蛹草，同时也优于冬虫夏草，尤其是虫草素的含量远高于蚕蛹草和冬虫夏草。可见蚕虫草是虫草素提取的最佳原料。

虫草素学名为3′-脱氧腺苷，外文名称为3′-deoxyadenosine，系从冬虫夏草中提取出来的一种天然核甙类新药，20世纪70年代被发现有抑制肿瘤、抗疟原虫和抑制mRNA翻译的作用；20世纪90年代研究发现，添加腺苷脱氨酶抑制剂对其抗肿瘤活性的表达起着重要作用。虫草素能干扰基因细胞RNA和DNA的合成，抑制癌细胞等不正常细胞的分裂，并能作为区别细胞中不同的RNA聚合酶的工具；同时，虫草素还表现出极强的抗真菌、抗HIV-I型病毒和选择性抑制梭菌的活性，引起医药学界的高度重视，虫草素在美国作为抗癌、抗病毒新药已经进入三期临床。

国内外仅报道虫草素能够人工合成，也能从冬虫夏草中提取，但产量很低，价格昂贵。当前的虫草素提取、纯化方法主要有：溶剂萃取-柱层析纯化、超声波强化提取-柱层析纯化、超临界流体萃取-超声波纯化等方法。但是溶剂萃取-柱层析纯化、超声波强化提取-柱层析纯化方法需要上柱，还需要脱色，不仅操作麻烦，而且有毒有机溶剂会带来污染；超临界流体萃取-超声波纯化虽然不进行化学反应，不生成有害物质，但所需设备特殊，不易进行大批量生产。

发明内容

本发明目的是提供一种蚕虫草(活性物质)虫草素的提取工艺，此工艺路线操作简单、效率高，既减少了旧工艺中上柱、脱色带来的操作麻烦、又避免了上柱过程中带来的有毒有机溶剂污染，而且能够进行大批量生产、提高得率，从而降低了成本，属于绿色技术和清洁生产新工艺，解决背景技术中所述存在的问题。

本发明目的是通过下面的技术方案实现的：蚕虫草(活性物质)虫草素的提取工艺，其工艺为：

1)蚕虫草经65℃烘干后，置于全封闭粉体设备中，在一定温度下采用机械挤压、撞击使固体成分乳化的方式进行粉碎；

2)将粉碎后的蚕虫草粉与取6-10倍于原料药重量的10-50％聚合物水溶液充分溶解后，按质量比为盐∶聚合物＝0.5-3∶1加入盐充分振荡，静止分相，离心分离，去其沉淀物得上层清液；

3)将步骤2)得到的上层清液依次用乙酸乙酯和石油醚洗涤后，真空干燥，得虫草素。

本发明技术方案采用双水相萃取法提取蚕虫草虫草素，有别于虫草素常规的提取方法，中国专利2012510084508.5公开了一种从蛹虫草子实体中提取精制虫草素的方法，采用的技术方案是：将蛹虫草子实体粉碎后加乙醇回流提取，滤液经正丁醇萃取后上硅胶柱洗脱，浓缩后的洗脱液室温结晶即可得虫草素，此方法与中国专利00130376.7公开的虫草素提取方法类似。现有文献《Production of cordycepin by surface culture using the medicinal mushroom Cordyceps militaris》(Mina Masuda,Eriko Urabe，《Enzyme and Microbial Technology》2006年第01期)采用Dowex-I-OH-1树脂柱从北冬虫夏草的培养滤液中分离得到虫草素。美国专利US8008060公开了一种从蛹虫草固体培养基残基中提取和纯化虫草素的方法以及制备虫草素干粉的方法，采用微波法进行提取，极大地提高了虫草素的粗提得率，达75％以上。上述文献中对虫草素的提取纯化工艺均为常规方法，工艺繁杂，且提取率不高。