[发明专利]一种从松木层孔菌中提取α‑葡萄糖苷酶抑制剂的方法

说明书

（一）技术领域

本发明涉及一种从松木层孔菌中提取α-葡萄糖苷酶抑制剂的方法。

（二）背景技术

药用真菌是一类具有较高药用价值的高等真菌，普遍具有抗肿瘤、降血糖、降血脂、抗病毒和增强免疫力等几种或多种功效。

糖尿病是一种慢性、多发性内分泌紊乱疾病，与癌症、心血管疾病一起被视为世界性三大疾病。糖尿病患者长期高血糖状态可引起微血管和大血管以及神经损害，导致眼、肾、心血管、神经系统等功能障碍，产生多种并发症。最近几十年随着人类营养过剩、工作压力过大，以及人口老龄化等因素不断加剧，糖尿病发生率快速攀升。根据世界著名医学杂志Lancet统计，全球糖尿病人数目前有近4亿！这还不包括数量更多的糖耐量减低症潜在人群。而我国的糖尿病患者人数近1亿，居世界首位，已经跨入糖尿病高患病率国家行列，糖尿病年治疗费用达1700多亿元人民币！在临床上根据发病机制不同，糖尿病主要分为Ⅰ型（胰岛素依赖型）和Ⅱ型糖尿病（非胰岛素依赖型），其中后者占总数的90%左右。

α-葡萄糖苷酶抑制剂（alpha-glucosidase inhibitors），如德国拜耳研发的阿卡波糖（Acarbose，商品名：拜糖苹）、米格列醇（Miglitol，商品名：奥恬苹）和日本武田制药的伏格列波糖（Voglibose，商品名：倍欣）是目前使用最普遍的抗Ⅱ型糖尿病临床口服药，目标是控制血糖在合理的水平，并预防和治疗并发症。在生产上，除阿卡波糖为生物发酵法合成外，米格列醇和伏格列波糖普遍采用化学修饰或化学合成法。

上述用于治疗Ⅱ型糖尿病的α-葡萄糖苷酶抑制药物虽然控制血糖作用肯定，但需长期服药，且出现较多不良反应，如导致低血糖、乳酸性中毒、胃肠道反应和耐药性等，在使用具有一定的局限性。而且国内应用的α-葡萄糖苷酶抑制剂主要是进口或专利期药，价格相对较贵，对多数长期服药的糖尿病患者经济压力较大。

我国是最早认识和利用食药真菌的国家之一，目前已临床药用的有灵芝、茯苓、猪苓、猴头、雷丸和冬虫夏草等二十余种，真菌代谢产物具有多种结构类型和多种生理活性，是寻找新的天然药物的重要来源。但是目前对食药用菌的大量药理研究主要集中在其水溶性多糖（尤其是β-葡聚糖）的增强免疫和抗肿瘤方面，对其产品开发也大多集中于此。而对其中的醇提物（三萜、皂甙和酚类等小分子物质）的深入研究和产品开发要少的多。

目前已有在食药用菌抗糖尿病、降血糖和α-糖苷酶抑制方面主要集中于桦褐孔菌（Inonotus obliquus）多糖方面。如1999年日本的Mizuno T等人研究发现，桦褐孔菌的菌丝和菌核中的多糖有降低血糖的作用，水溶性和非水溶性多糖对糖尿病小鼠都有降血糖作用，活性成分主要是β-葡聚糖、杂多糖和蛋白复合物。2005年，韩国的Yang B.K.等人研究发现相比对照组，糖尿病小鼠口服桦褐孔菌菌丝体可减少23.1%的血糖浓度。2006年，韩国的Cha,Jae-Young等人发现桦褐孔菌发酵物可降低糖尿病小鼠的血糖水平。Mizuno T等从桦褐孔菌菌核和菌丝体中提取和部分纯化得到含蛋白的多糖。实验表明可溶和不可溶性多糖均有降血糖的作用。其有效成分为β-葡聚糖、杂多糖及它们的蛋白质复合物。在我国，延边大学的张香花等人在2008年的研究表明桦褐孔菌提取物对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠的胰岛、肝和肾组织损伤病变有一定的保护和修复作用。2008年，江南大学的孙军恩研究发现桦褐孔菌发酵菌粉及其多糖提取物具有良好的降血糖、降血脂和抗氧化能力。而且桦褐孔菌发酵菌粉及其多糖组分可能降糖机理包括修复糖尿病小鼠受损胰岛β细胞、促进胰岛素分泌、增加肝糖原含量和提高糖尿病小鼠抗氧化能力。

而小分子的酚类物质是指在苯环上具有一个或多个羟基的化合物，主要包括黄酮类、酚酸类等单体和鞣酸、单宁类等多聚物。酚类化合物具有抗氧化、抗癌、抗过敏、消炎、降血脂、抑制动脉硬化和抗衰老等多种功效，是近几十年来活性物质研究的热点之一，但其对α-糖苷酶的抑制作用和降血糖功能在近十余年才逐渐有报道。