[发明专利]精浆联检试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及生物医学检验测定技术领域，尤其是涉及一种体外诊断用精浆联检试剂盒。

背景技术

精浆是男性附属性腺分泌物的混合液, 有输送精子、提供精子营养、激发精子活力等作用。对精浆进行分析可以直接、客观地评估男性的生育能力、查找男性不育原因,为人工受精提供精子的质量依据,同时还可以检测生殖系统的炎症及肿瘤，而且对前列腺、附睾和精囊腺的功能进行客观评价，为相关疾病的诊断、治疗和预后监测提供帮助。

精液中白细胞的含量是诊断生殖系统炎性反应和不育的重要指标，临床上通常以白细胞的多少来诊断生殖系统感染或炎性反应，但目前认为这种诊断方法是不可靠的。在精液检查时,常见到一些圆形细胞,未经染色很难分类鉴别,若把这些圆细胞误认为是白细胞,就可能导致错误诊断。虽然正甲苯胺过氧化物酶可以区别白细胞和其他的圆形细胞，但是操作费时、费力，不利于临床快速、多标本量的检测。

精液中的卵磷脂小体来源于前列腺液，既可作诊断慢性前列腺炎的参考指标,又可作为判断性功能状态的客观指标。目前，临床主要通过镜检的方式检测精液中的卵磷脂小体，由于经验和仪器的误差，会造成结果的客观性降低。

精浆中的柠檬酸、锌和酸性磷酸酶主要来源于前列腺，是WHO公认的反映前列腺分泌功能的指标。患有前列腺炎时，这三个指标会下降。目前，检测这三个指标采用的是手工生化反应或者酶法，使用分光光度计或者生化分析仪进行检测。但所用试剂价格高，操作繁琐，且稳定性较差、批间差较大，不能很好地满足现有临床的需求。

弹性蛋白酶可作为静止型生殖道感染的诊断及愈后监测指标，其可靠性得到了世界卫生组织的认可。目前，弹性蛋白酶的临床或实验室诊断方法有：免疫细胞化学法、ELISA 方法。但现有检测方法检测时间长、操作繁琐，且需要特殊仪器，无法满足临床快速、简便的需求。

精浆果糖是男性副性腺精囊所分泌的特征性物质,果糖含量还能间接反映睾丸间质细胞分泌睾酮的功能。目前，检测果糖的方法主要有生化显色法和酶法，采用手工和半自动操作，加样程序多，操作繁琐，给临床应用带来极大的不便。

    中性α-葡萄糖苷酶是附睾分泌功能的标志酶和特异性酶。精浆中性α-葡萄糖苷酶结合其他指标如精浆果糖、精子染色等的检测，还可实现梗阻性无精子症患者的梗阻部位定位，分泌型或排泄型无精子症的鉴别、附睾水平上局部梗阻的判断等。目前，精浆中性α-葡萄糖苷酶检测的方法为化学比色法，该法多为手工或半自动操作，加样程序多，操作步骤复杂，试剂和样品混匀一定时间后，通过分光光度计逐一进行比色测定，再根据标准曲线回算出结果，耗时耗力，且人为误差也比较大。

发明内容

本发明的目的在于提供一种快速、准确、简便、实用的精浆联检试剂盒，该试剂盒可对多种腺体功能进行综合评价，为相关疾病的诊断和治疗提供准确信息。

为实现上述目的，本发明可采取下述技术方案：

本发明所述的精浆联检试剂盒，它包括至少五种检测试剂，所述五种检测试剂为白细胞酯酶检测试剂、卵磷脂小体检测试剂、酸性磷酸酶检测试剂、果糖检测试剂和中性α-葡萄糖苷酶检测试剂，其中

白细胞酯酶检测试剂由Tris-HCl缓冲液，糖和5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸酯溶液配制而成；所述Tris-HCl缓冲液的浓度为0.01~2mol/L，pH 7.0~10.0,所述糖为蔗糖、葡萄糖、海藻糖或乳糖，浓度为30~60g/L，所述5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸酯溶液的浓度为0.001~1 mol/L；

卵磷脂小体检测试剂由硼酸盐缓冲液、锌试剂溶液和氯化锌溶液配制而成；所述硼酸盐缓冲液的pH为7~10，其中氯化钾：0.1~100g/L，硼酸：0.1~100g/L，氢氧化钠：0.01~10g/L；所述锌试剂溶液中含有0.1~100g/L 的5-(2-羧基苯基)-1-(2-羟基-5-磺基苯基)-3-苯基甲单钠盐；所述氯化锌溶液中氯化锌含量为0.1~100g/L；

酸性磷酸酶检测试剂中包括0.1~75g/L的柠檬酸， 0.1~90g/L的磷酸苯二钠，0.1~65g/L 的4-氨基安替比林，0.1~88g/L的氢氧化钠；

果糖检测试剂由盐酸或硫酸10~60%，间苯二酚浓度为0.1~2.0g/L配制的底物溶液组成；或由浓度为250~300μmol/L的碘硝基四唑紫、氯化硝基四氮唑蓝或噻唑蓝配制的底物溶液组成；