[发明专利]流感病毒为载体的HAdV嵌合疫苗的制备及其应用

权利要求书

1.SEQ ID No.1所示的DNA分子。

2.一种重组病毒，该病毒按照如下方法制备：

将分别含有冷适应、减毒流感病毒的PB2基因、冷适应、减毒流感病毒的PB1基因、冷适应、减毒流感病毒的PA基因、冷适应、减毒流感病毒的NP基因、冷适应、减毒流感病毒的M基因和冷适应、减毒流感病毒的NS基因的表达质粒，以及分别含有靶标流感病毒的HA基因和靶标流感病毒的NA基因的表达质粒共转染宿主细胞，培养得到重组流感病毒；

其中，在所述冷适应、减毒流感病毒的NS基因的开放读码框的自5’末端起第375位至第376位核苷酸之间插入HAdV的结构蛋白基因，所述HAdV的结构蛋白基因与所述冷适应、减毒流感病毒的NS基因的开放读码框的自5’末端起第375位核苷酸之间连有5’-UAAUG-3’序列，所得序列为SEQ ID No.2中第41-1162位核苷酸所示；

或，将所述冷适应、减毒流感病毒的M基因的开放读码框的自5’末端起第223位至第760位核苷酸替换为HAdV的结构蛋白基因，所得序列为SEQ ID No.3中第40-759位核苷酸所示；

或，将所述靶标流感病毒的NA基因的开放读码框的自5’末端起第184位至第1253位核苷酸替换为HAdV的结构蛋白基因，所得序列为SEQ ID No.4中第35-650位核苷酸所示；

所述HAdV的结构蛋白基因为HAdV的六邻体蛋白塔区Loop1和Loop2的优势抗原表位基因的融合基因；

所述HAdV的六邻体蛋白塔区Loop1和Loop2的优势抗原表位基因的融合基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

3.根据权利要求2所述的病毒，其特征在于：所述宿主细胞为MDCK、Vero、293T、COS细胞或MDCK/293T、MDCK/COS共培养的细胞。

4.根据权利要求2所述的病毒，其特征在于：所述HAdV为3型HAdV或7型HAdV。

5.根据权利要求4所述的病毒，其特征在于：所述3型HAdV为HAdV-3病毒株VR-3；

所述7型HAdV为HAdV-7病毒株GZ08，GenBank accession No.GQ478341。

6.根据权利要求2-5任一所述的病毒，其特征在于：所述冷适应、减毒流感病毒为冷适应、减毒A型流感病毒或冷适应、减毒B型流感病毒；

所述靶标流感病毒为A型流感病毒或B型流感病毒。

7.根据权利要求6所述的病毒，其特征在于：所述冷适应、减毒A型流感病毒为H2N2亚型冷适应、减毒流感病毒；所述A型流感病毒为H1亚型-H16亚型中的任意一种。

8.根据权利要求7所述的病毒，其特征在于：所述H2N2亚型冷适应、减毒流感病毒为冷适应、减毒流感病毒株A/Ann Arbor/6/60(H2N2)；所述A型流感病毒为流感病毒株A/California/07/2009(H1N1)。

9.由权利要求2-8任一所述的病毒制备得到的嵌合疫苗。

10.权利要求1所述的DNA分子在制备预防和/或治疗流感病毒和/或HAdV引起的疾病的产品中的应用。

11.根据权利要求10所述的应用，其特征在于：所述流感病毒为A型流感病毒或B型流感病毒。

12.根据权利要求11所述的应用，其特征在于：所述A型流感病毒为H1亚型-H16亚型中的任意一种；

所述HAdV为3型HAdV或7型HAdV。

13.权利要求2-8任一所述的病毒在制备预防和/或治疗流感病毒和/或HAdV引起的疾病的产品中的应用。

14.根据权利要求13所述的应用，其特征在于：所述流感病毒为A型流感病毒或B型流感病毒。

15.根据权利要求14所述的应用，其特征在于：所述A型流感病毒为H1亚型-H16亚型中的任意一种；

所述HAdV为3型HAdV或7型HAdV。

16.权利要求9所述的嵌合疫苗在制备预防和/或治疗流感病毒和/或HAdV引起的疾病的产品中的应用。