[发明专利]甜瓜枯萎病抗性与全雌系分子标记辅助选择的引物及方法

权利要求书

1.一种甜瓜枯萎病抗性与全雌系分子标记辅助选择的引物，被确定为甜瓜枯萎病抗性与全雌系植株所需的分子标记同时含有三个，其特征在于，所述的三个分子标记需用四组引物对进行扩增：

(1)标记甜瓜性别基因A基因的引物对为：

A-as：如序列表Seq No.1所示，

A-s：如序列表Seq No.2所示；

(2)标记甜瓜性别基因G、g基因的两对引物对，其中标记G基因的引物对为：

G-as：如序列表Seq No.3所示，

G-s：如序列表Seq No.4所示；

(3)标记g基因的引物对为：

g-as：如序列表Seq No.5所示，

g-s：如序列表Seq No.6所示；

(4)标记甜瓜枯萎病抗性的Fom-2基因的引物对为：

F-s：如序列表Seq No.7所示，

F-as：如序列表Seq No.8所示。

2.根据权利要求1所述的一种甜瓜枯萎病抗性与全雌系分子标记辅助选择的引物得出的一种甜瓜枯萎病抗性与全雌系分子标记辅助选择方法，其特征在于，通过如下步骤完成：

(1)以全雌系感枯萎病材料WI998为母本，雄全同株抗枯萎病材料MR-1为父本杂交，获得F₁代植株：

(2)将F₁代自交，得到F₂代植株；

(3)取F₂代植株叶片提取基因组DNA，对甜瓜抗枯萎病和全雌系性状进行分子标记定位，以A-as、A-s引物对标记AA基因，以G-as、G-s引物对及g-as、g-s引物对标记gg基因，以F-s、F-as引物对标记抗枯萎病FF基因；

(4)以酶切PCR产物及田间复查甜瓜植株的方式确定分子标记定位的准确性，确定标记得到的甜瓜植株的基因型为AAggFF。

3.根据权利要求1所述的一种甜瓜枯萎病抗性与全雌系分子标记辅助选择的引物，其特征在于，分子标记的反应程序为：

将混合液在94℃预变性8min；然后94℃变性30s，51℃退火30s，72℃延伸1min，35个循环；最后72℃终延伸10min；所述混合液组成如下：

扩增产物用质量浓度为1％琼脂糖凝胶电泳观察结果。