[发明专利]一种软骨再生支架材料的制备方法

权利要求书

1.一种软骨再生支架材料的制备方法，其特征在于，以死亡动物新鲜的背部、面部或臀部皮肤为原料，经深低温处理、脱毛、病毒灭活、脱细胞、结构重塑、交联、冻干、再修饰及灭菌处理工艺得到成品。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述动物包括但不限于猪、牛、马、羊的新生个体。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，深低温处理的工艺包括但不限于深低温冷冻或反复冻融以降低免疫原性；所述深低温冷冻的条件为：-200℃～-10℃冷冻1～90天；反复冻融的条件为：-200℃～-10℃冷冻1～90天，反复冻融2～3次。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，脱毛工艺使用质量百分含量为2～10%的溶剂I浸泡处理0.5～24h；所述溶剂I包括但不限于巯基乙酸、Na₂S、胰蛋白酶、胃蛋白酶溶液。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，病毒灭活采用低浓度过氧乙酸-乙醇溶液、乙醇溶液、过氧化氢溶液、碱溶液或含吐温80的磷酸三丁酯溶液中的任一种溶液通过浸泡处理以灭活病毒。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，采用过氧乙酸-乙醇溶液浸泡法灭活病毒，溶液中过氧乙酸的质量百分含量为0.05～0.2%，乙醇的质量百分含量为0.15～0.6%，浸泡温度为4～40℃，病毒灭活时间为1～2h；或采用含吐温80的磷酸三丁酯溶液进行浸泡处理，溶液中磷酸三丁酯和吐温80的质量百分含量分别为0.1～0.5%和1～2%，浸泡温度为24℃，灭活时间为5～10h。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，脱细胞工艺在温度为20-40℃的超声波清洗器中进行，使用溶剂II浸泡处理2～16h；所述溶剂II中胰蛋白酶、十二烷基硫酸钠和聚乙二醇辛基苯基醚的质量百分含量分别为0.03～1%、0.01～0.25%和0.1～1%；结构重塑工艺使用质量百分含量为0.03～1%的胰蛋白酶溶液浸泡处理0.5～8h。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，交联工艺使用质量百分含量为0.1～5%的溶剂III浸泡处理0.5～4h；所述溶剂III包括但不限于甲醛、戊二醛、京尼平、1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亚胺、1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亚胺、N-羟基琥珀酰亚胺的水溶液。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，再修饰工艺具体为：将经过交联处理后的材料进行冻干，然后浸泡于质量百分含量为0.01～1%的溶剂IV中0.5～2h；所述溶剂IV为硫酸软骨素、透明质酸钠、软骨细胞生长因子溶液中的一种或多种。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，灭菌处理工艺包括但不限于伽马射线辐照灭菌、高能电子束灭菌及环氧乙烷灭菌。