[发明专利]一种微生物谷氨酰胺转胺酶及其制备的日常用止血产品

权利要求书

1.一种新的微生物谷氨酰胺转胺酶mTG，其特征在于，该mTG与野生型mTG相比发生了四个位点的氨基酸突变，即S23A、G73Y、K317Q、K325Q。

2.如权利要求1所述的谷氨酰胺转胺酶mTG，其特征在于，该酶具有如SEQ ID NO：3所述的基因编码的蛋白序列；或者，具有如SEQ ID NO：4所述的蛋白序列。

3.如权利要求1所述的谷氨酰胺转胺酶mTG，其特征在于，该酶电泳纯度为至少90％以上，比活性大于25U／毫克，优选地，纯度为95％以上，且比活性大于25U／毫克；其中该酶的最适反应温度在25-45摄氏度之间。

4.用于编码权利要求1-3之任一项所述酶的基因序列。

5.一种日常生活创伤失血的快速止血产品，其特征在于，该产品中包含权利要求1-3之任一项所述的酶为主活性基质，或者包含权利要求4的基因所编码的酶为主要活性基质。

6.如权利要求5所述的止血产品，其特征在于，包括贴剂、膏剂(软膏剂、硬膏剂)、糊剂、搽剂。

7.如权利要求6所述的止血产品，其特征在于，所述贴剂的基质包括含有活性谷氨酰胺转胺酶成分的药芯(即储药层)、将药芯固定在伤口上的粘附层。

8.如权利要求7所述的止血产品，其特征在于，所述贴剂包括创可贴、ok绷、止血绑带。

9.如权利要求8所述的止血产品，其特征在于，所述创可贴、ok绷、止血绑带包括固定透气胶带，并且其所用粘附层、固定透气胶带均为市场上通用品；其中所述创可贴、ok绷、止血绑带的透气胶带包括现有任何胶带，例如PVP胶带、弹力布、PU胶带、氧化锌胶布，以及任何对皮肤无伤害的弹性胶带。

10.如权利要求9所述的止血产品，其特征在于，所述药芯包括或不包括具有止血和促进伤口愈合功能的明胶。

11.如权利要求6所述的止血产品，其特征在于，所述膏剂、糊剂、搽剂的基质选自不具有止血和促进伤口愈合功能的药学上可接受的辅料；所述膏剂包括软膏剂、硬膏剂。

12.如权利要求11所述的止血产品，其特征在于，其中膏剂的药学上可接受的辅料包括易被皮肤吸收的软性基质，以橡胶为主要基质并与树脂、脂肪或类脂性物质形成的硬性基质；其中，软性基质包括凡士林、液状石蜡、羊毛脂、蜂蜡、动物油、植物油、单硬质酸甘油酯、十八醇之任一种或其任意混合物。

13.如权利要求11所述的止血产品，其特征在于，其中所述搽剂的药学上可接受的辅料包括乙醇、油或适当的溶剂形成的基质；其中，所述油包括动物油、植物油或矿物油，所述溶剂包括生理盐水、或与生理盐水等渗的缓冲液。

14.如权利要求5-13之任一项所述的止血产品，其中以上所述基质包括或不包括明胶。

15.制备上述任一项权利要求中所述日常生活创伤失血的止血产品的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)制备能表达所述微生物谷氨酰胺转胺酶的重组微生物，并进行重组表达；

(2)收集并纯化具有所述活性的谷氨酰胺转胺酶，并配置成活性溶液；

(3)通过常规方法，将所述谷氨酰胺转胺酶的活性溶液添加在不具有止血和促进伤口愈合功能的基质上；

(4)将所述基质进行常规处理，即得到所述日常生活创伤失血的止血产品。

16.如权利要求15所述的方法，其特征在于，所述止血产品包括贴剂、膏剂、糊剂、搽剂；其中膏剂包括软膏剂、硬膏剂。

17.如权利要求16所述的方法，其特征在于，所述止血产品为贴剂，其中通过喷洒、涂布或浸泡方法将所述微生物谷氨酰胺转胺酶溶液添加在所述药芯上，并将药芯附加在粘附层上，经挤压、干燥、分割，得到贴剂。

18.如权利要求17所述的方法，其特征在于，所述微生物谷氨酰胺转胺酶溶液为25U／ml～300U／ml；其中，所述干燥温度不超过50℃。

19.如权利要求16所述的方法，其特征在于，通过将所述微生物谷氨酰胺转胺酶溶液与不具有止血和促进伤口愈合功能的药学上可接受的辅料进行混匀，直至制备成膏剂或糊剂、搽剂，所述混匀方法包括机械混匀、加热混匀、乳化混匀。

20.如权利要求15-19之任一项所述的方法，其特征在于，所述基质包括或不包括明胶。