[发明专利]一种金线莲组培的培养基抗菌剂及其制备方法有效
申请号: | 201410035582.7 | 申请日: | 2014-01-25 |
公开(公告)号: | CN103918714A | 公开(公告)日: | 2014-07-16 |
发明(设计)人: | 黄阿贤 | 申请(专利权)人: | 漳州美利德生物工程有限公司 |
主分类号: | A01N61/00 | 分类号: | A01N61/00;A01P1/00;A01P3/00;C05G3/00;A01N43/16 |
代理公司: | 厦门龙格专利事务所(普通合伙) 35207 | 代理人: | 郑晓荃 |
地址: | 363600 福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 金线莲组培 培养基 抗菌剂 及其 制备 方法 | ||
技术领域
本发明涉及金线莲组培的生物技术,尤其是指金线莲组培过程中培养基抗菌剂的配制技术。
背景技术
金线莲是一种名贵中药材,素有药王之称,由于天然野生极少,组培种植前景较好。现有金线莲组培培养基大都采用MS培养基或B5培养基为母液,添加蛋白胨,琼脂等。在组培过程中因受环境、培养基及人工技术等多方面因素影响,导致苗瓶污染率较高,从而提高组培成本。目前解决的手段是在培养基中加入杀菌剂,如青霉素或氯霉素.四环素等抗生素,甚至添加多菌灵咪酰胺等农药,虽起到一定的杀菌效果,但很难控制农残,再者抗生素及农药杀菌剂的添加也影响金线莲的生长。
发明内容
为了解决现有技术存在的问题,本发明目的在于提供一种金线莲组培的培养基抗菌剂及其制备方法,所述的培养基抗菌剂具有较好抑菌、杀菌作用,又能降低农残,促进金线莲的生长。
为实现上述目的,本发明技术方案为:
一种金线莲组培的培养基抗菌剂,包括MS培养基母液或B5培养基母液,还包括有壳聚糖和茶多酚;每1000毫升的所述培养基抗菌剂中,壳聚糖的添加比例是1-5克,茶多酚的添加比例是1-4克。还包括有香蕉泥、蔗糖和蛋白胨;每1000毫升的所述培养基抗菌剂中,香蕉泥的添加比例是80-120克,蔗糖的添加比例是15-30克,蛋白胨的添加比例是2-4克。还包括有吲哚丁酸钾、萘乙酸钠和6嘌呤-苄氨基;每1000毫升的所述培养基抗菌剂中,吲哚丁酸钾的添加比例是0.2-0.5毫克、萘乙酸钠的添加比例是0.2-0.6毫克、6嘌呤-苄氨基的添加比例是0.5-1毫克。所述培养基抗菌剂用盐酸或氢氧化钠调PH值至5.4-5.7。
一种金线莲组培的培养基抗菌剂的制备方法,其特征在于:每1000毫升的培养基抗菌剂制备步骤如下:
步骤一,称取70毫升-100毫升的MS培养基母液或B5培养基母液待用;
步骤二,称取5.5-7克的琼脂放在热水中充分搅拌溶解后待用;
步骤三,称量1-5克的壳聚糖和1-4克的茶多酚,及80-120克的香蕉泥、15-30克的蔗糖和2-4克的蛋白胨放在热水中充分搅拌溶解后待用;
步骤四,在MS培养基母液或B5培养基母液中加 入吲哚丁酸钾0.2-0.5毫克、萘乙酸钠0.2-0.6毫克、6嘌呤-苄氨基0.5-1毫克,并充分溶解;
步骤五,在步骤二中的琼脂中加入步骤三配制的溶液,并充分搅拌溶解;
步骤六,混合步骤四和步骤五所配制的溶液,并充分搅拌溶解,加热水定量制得1000毫升的培养基抗菌剂;
其中,步骤一、步骤二和步骤三的顺序可置换,步骤四和步骤五的顺序可置换。
将配制好的培养基抗菌剂趁热倒入培养器中,培养基抗菌剂占容器的体积为1/3-1/4,在121℃-126℃,压力111-115千帕下维持15-20分钟,灭菌后冷却静置5天后使用。
本发明培养基抗菌剂采用壳聚糖和茶多酚,壳聚糖和茶多酚不仅具有较好抑菌、杀菌作用,且是有益健康的养生精品,在有效降低农残的同时,又能促进金线莲的健康生长。香蕉泥.蛋白胨富含有机钾.有机氮能有效提供金线莲养分需求,同时提高金线莲各种有效成分含量,确保药效。
具体实施方式
为了使本发明所要解决的技术问题、技术方案及有益效果更加清楚、明白,以下通过实施例,对本发明进行进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具 体实施例仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。
本发明提供的金线莲组培的培养基抗菌剂,在每1000毫升的所述培养基抗菌剂中,包括70-100毫升的MS培养基母液B5培养基母液待用、1-5克的壳聚糖、1-4克的茶多酚、80-120克的香蕉泥、15-30克的蔗糖、2-4克的蛋白胨、0.2-0.5毫克的吲哚丁酸钾、0.2-0.6毫克的萘乙酸钠和0.5-1毫克的6嘌呤-苄氨基,且所述培养基抗菌剂用盐酸或氢氧化钠调PH值至5.4-5.7。
实施例一
本发明每1000毫升的金线莲组培的培养基抗菌剂的制备步骤是:
步骤一,MS培养基母液的的配制:
母液A:硫酸镁18.5克硝酸铵82.5克硝酸钾95.0克,加入水定容到1000毫升,配1升培养基抗菌剂量取20毫升
母液B:氯化钙22.0克加入水定容到500毫升,配1升量培养基抗菌剂取10毫升。
母液C:磷酸二氢钾8.5克加入水定容500毫升,配1升培养基抗菌剂量取10毫升
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