[发明专利]一种定量检测美克尔憩室病特异抗原的方法

说明书

技术领域

本发明属于美克尔憩室检测技术领域，尤其涉及一种定量检测美克尔憩室病特异抗原的方法。

背景技术

美克尔憩室是消化道最常见的先天性畸形。正常人群发生率高达2%～4%，终身发病率为4%～6%。美克尔憩室病不易术前诊断，是普外科常见的鉴别疾病。目前，美克尔憩室的诊断主要依靠锝99检查，其敏感度85%、特异度67%，价钱昂贵耗时长，具有放射性，仅少数医院购置；其次依靠腹腔镜及术中诊断，是有创检查。当今临床上有外周血检测异位组织抗体诊断子宫内膜异位症技术的成熟技术，但空缺外周血诊断美克尔憩室的检验方法。

发明内容

本发明实施例的目的在于提供一种定量检测美克尔憩室病特异抗原的方法，旨在解决现有缺少外周血诊断美克尔憩室检验方法的问题。

本发明实施例是这样实现的，一种定量检测美克尔憩室病特异抗原的方法，该定量检测美克尔憩室病特异抗原的方法包括以下步骤：

第一步，将美克尔憩室和无美克尔憩室小肠双向蛋白电泳，依据蛋白质电荷及分子量差异将蛋白质分散于凝胶，应用蛋白质组学技术分析差异性蛋白并得出具体蛋白名称，选取差异最明显的蛋白进行实验；

第二步，用免疫组化、定量PCR法检查美克尔憩室和无美克尔憩室小肠组织和血液中的特异性基因蛋白的表达实付和前相符合；

第三步，抽取患儿外周血，上肢浅表静脉，放置于查肝肾功能管内4℃保存，24小时内检测，确保蛋白质不变性；提取患儿外周血RNA，逆转录为cDNA，应用定量PCR法检测美克尔憩室特异抗原基因含量，单位为循环数c；提取外周血蛋白质，定量化后应用ELISA法检查每毫升美克尔憩室特异抗原蛋白质量，单位为微克，匹克；

并与手术结果对比，大量样本试验后应用统计学软件计算常值范围；

第四步，检测疑是患者美克尔憩室特异抗原及基因含量长期改善。

进一步，该定量检测美克尔憩室病特异抗原的方法包括：

将美克尔憩室和无美克尔憩室小肠双向蛋白电泳，比较差异蛋白并得出具体蛋白名称，选取差异最明显的蛋白进行实验；

用免疫组化、定量PCR法检查美克尔憩室和无美克尔憩室小肠组织和血液中的特异性基因蛋白的表达实付和前相符合；

定量PCR法检测美克尔憩室和无美克尔憩室人群血液中的特异性基因的表达，判断正常值范围，并与手术结果对比；

定量PCR法检测疑是患者，并与手术结果对比。

本发明提供的定量检测美克尔憩室病特异抗原的方法，通过将美克尔憩室和无美克尔憩室小肠双向蛋白电泳，比较差异蛋白并得出具体蛋白名称，选取差异最明显的蛋白进行实验；用免疫组化、定量PCR法检查美克尔憩室和无美克尔憩室小肠组织和血液中的特异性基因蛋白的表达实付和前相符合；定量PCR法检测美克尔憩室和无美克尔憩室人群血液中的特异性基因的表达，判断正常值范围，并与手术结果对比；定量PCR法检测疑是患者，并与手术结果对比，实现了外周血诊断美克尔憩室的检验，降低了检测者的费用，提高了效率，避免了对检测者的二次伤害。本发明的操作简单，检测效率较高，是一种可靠的美克尔憩室病特异抗原检测方法。

附图说明

图1是本发明实施例提供的定量检测美克尔憩室病特异抗原的方法流程图。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

下面结合附图及具体实施例对本发明的应用原理作进一步描述。

如图1所示，本发明实施例的定量检测美克尔憩室病特异抗原的方法包括以下步骤：

S101：将美克尔憩室和无美克尔憩室小肠双向蛋白电泳，比较差异蛋白并得出具体蛋白名称，选取差异最明显的蛋白进行实验；

S102：用免疫组化、定量PCR法检查美克尔憩室和无美克尔憩室小肠组织和血液中的特异性基因蛋白的表达实付和前相符合；

S103：定量PCR法检测美克尔憩室和无美克尔憩室人群血液中的特异性基因的表达，判断正常值范围，并与手术结果对比；

S104：定量PCR法检测疑是患者，并与手术结果对比。

本发明的具体步骤为：

第一步初步筛选：将美克尔憩室和无美克尔憩室小肠双向蛋白电泳，比较差异蛋白并得出具体蛋白名称，选取差异最明显的蛋白进行实验；