[发明专利]一种莱苞迪苷C的纯化工艺

说明书

技术领域

本发明涉及植物中活性成分的提取纯化技术领域，具体涉及一种莱苞迪苷C的纯化工艺。

背景技术

甜菊糖是一种从菊科草本植物甜叶菊(或称甜菊叶)中精提的新型天然甜味剂，它具有高甜度、低热能的特点，其甜度是蔗糖的200～300倍，热值仅为蔗糖的1/300。经大量科学实验及他国长期食用历史证明，甜菊糖苷无毒无副作用，无致癌物，食用安全，是一种可替代蔗糖非常理想的甜味剂；而南美洲使用甜叶菊作为药草和代糖已经有几百年历史。国际甜味剂行业的资料显示，甜菊糖苷已在亚洲、北美、南美洲和欧盟各国广泛应用于食品、饮料、调味料的生产中。

甜菊糖是一类由甜叶菊醇这种四环二萜化合物连接不同数目的配糖体组成的糖甙混合物。目前研究发现的有12种物质，被人们认可并且做过医学毒理实验的有八种，具体为：(1)甜菊糖甙(stevioside)(St)；(2)甜菊醇双糖甙(steviolbioside)；(3)莱苞迪苷A(rebaudioside A)(RA)；(4)莱苞迪苷B(rebaudioside B)(RB)(5)莱苞迪苷C(rebaudioside C)(RC)；(6)莱苞迪苷D(rebaudioside D)(RD)；(7)莱苞迪苷E(rebaudioside E)(RE)；(8)杜尔可甙A(dulcoside A)(DA)。这些配糖体中,含量高,且有经济价值的糖甙体有St、RA、RC、DA四种。这些不同的组分的口味均不同，能够面对不同的消费人群。目前市面上的甜叶菊产品主要是RA和STV，公开号为CN102321132A的发明专利公开了一种甜菊糖甙RC粗提取物的提纯方法，具体是将母液糖配置为15～20mg/ml的料液，将料液以1.5～3.0L/min的速度流过大孔吸附树脂柱；待吸附完全后，用75%～80%质量浓度的乙醇洗脱吸附在树脂柱上的甜菊糖甙，分段收集洗脱液，确定临界点，将临界点的洗脱液在60～80℃的温度下浓缩，将得到的固体和液体分别干燥，得到RC含量达30%以上粗制甜菊糖甙。该方法操作简单，但所得产品中RC含量不高。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种方法简单易操作、所得RC含量高且收率也高的莱苞迪苷C的纯化工艺。

本发明所述的莱苞迪苷C的纯化工艺，包括以下步骤：

1)将粗甜菊提取物用溶剂A结晶，取母液过大孔树脂柱，先用碱液洗柱，然后用酸液洗柱，再用水洗柱至流出液呈中性，之后用pH为3～5的10～30v/v%乙醇洗脱，最后用pH为7～8的60～85v/v%乙醇洗脱，收集60～85v/v%乙醇洗脱液，浓缩，干燥，得到莱苞迪苷C粗品；其中：

所述粗甜菊提取物中莱苞迪苷C的含量≥10wt%，优选莱苞迪苷C的含量为12～13wt%。

所述的溶剂A为60～80v/v%甲醇、60～80v/v%乙醇、60～80v/v%丙酮或60～80v/v%乙酸乙酯；

所述的碱液为0.5～3w/w%的氢氧化钠水溶液或0.5～3w/w%的氢氧化钾水溶液；

所述的酸液为0.5～3w/w%的盐酸水溶液或0.5～3w/w%的硫酸水溶液；

2)取莱苞迪苷C粗品用溶剂B溶解，用酸调其pH为3～5，2～10℃条件下析晶，收集晶体，水洗至中性，干燥，即得莱苞迪苷C；其中：

所述的溶剂B为50～60v/v%甲醇或50～60v/v%乙酸乙酯；

所述的酸为冰醋酸或甲酸。

本发明通过先对粗甜菊提取物进行结晶，可以使其中的RC含量提高到20%以上，且原料中的RA、STV有了显著的减少，有利于后序柱层析中RC的分离。然后对吸附了母液的大孔树脂柱进行碱处理，有效去除被吸附的黄酮色素等物质；再进行酸处理，在起到中和作用的同时去除一些弱碱性杂质；上述酸碱处理既不会对产品中的RC造成破坏，而且在实现除杂目的的同时还有利于后序的结晶操作，提高所得产品中RC的含量及收率。之后再用调了pH值的乙醇进行洗脱，并结合酸性条件下进行结晶的技术方案，使得在进行一次结晶所得产品中的RC含量和收率得到显著提高，所得产品的RC含量达97%以上(HPLC法，下同)，收率达75%以上(以莱苞迪苷C粗品中RC的为基准计算)。

上述技术方案中，