[发明专利]一种组织培养长穗火炬花的方法有效
申请号: | 201410024946.1 | 申请日: | 2014-01-20 |
公开(公告)号: | CN103766219A | 公开(公告)日: | 2014-05-07 |
发明(设计)人: | 黄建荣;申瑞雪;陈建华;沈勤 | 申请(专利权)人: | 上海上房园艺有限公司;上海上房园林植物研究所有限公司 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 | 代理人: | 林君如 |
地址: | 201114*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 组织培养 火炬 方法 | ||
1.一种组织培养长穗火炬花的方法,其特征在于,该方法采用以下步骤:
(1)芽诱导培养
摘取长穗火炬花小芽,洗净后2h用75v/v%的乙醇浸泡30s、1wt‰升汞浸泡15min、无菌水冲洗5-6次,然后吸干表面水份,取嫩芽基部切成1cm长,接种于芽诱导培养基上,控制培养温度为24-28℃,光照为70-100μmol/ms,进行芽诱导培养;
(2)芽分化增殖
嫩芽接种于芽诱导培养基上5周后芽基部开始膨大并出现黄绿色突起,3周后可见明显的愈伤组织继续培养1个月,切下带芽愈伤组织放入增殖培养中,控制培养温度为24-28℃,光照为70-100μmol/ms进行增殖培养,不定芽生长迅速并无玻璃化的不良现象;
3)不定芽壮苗培养
诱导出的丛生芽每丛有2-3株可以伸长,其余处于矮化状态,将其分成小丛或单芽后,放入壮苗培养基,控制培养温度为24-28℃,光照为70-100μmol/ms进行壮苗培养,不定芽迅速伸长,20天后可以长到2-3cm;
4)生根培养
取2-3cm的小植株,转接入生根培养基中,控制培养温度为24-28℃,光照为70-100μmol/ms进行诱导生根,10天后幼苗基部分化出许多白色的根原基,30天后长至3-4cm;
(5)炼苗与移栽
生根培养20-30天,根系长至1-2cm,选择根系发达生长健壮的无菌苗,室内开瓶炼苗5天,取出后洗净根部琼脂,在温室中驯化40天后,移栽室外即可。
2.根据权利要求1所述的一种组织培养长穗火炬花的方法,其特征在于,所述的芽诱导培养基的基础成分为蔗糖20-40g/L,琼脂3-8g/L,营养成分为MS+6-BA1.0-5.0mg/L+NAA0.1-0.5mg/L,芽诱导培养基的pH值为5.5-6。
3.根据权利要求2所述的一种组织培养长穗火炬花的方法,其特征在于,所述的芽诱导培养基的营养成分优选MS+6-BA3mg/L+NAA0.3mg/L。
4.根据权利要求1所述的一种组织培养长穗火炬花的方法,其特征在于,所述的增殖培养基的基础成分为蔗糖20-40g/L,琼脂3-8g/L,营养成分为MS+6-BA1.0-3.0mg/L+NAA0.1-0.3mg/L,增殖培养基的pH值为5.5-6。
5.根据权利要求4所述的一种组织培养长穗火炬花的方法,其特征在于,所述的增殖培养基的营养成分优选MS+6BA1mg/L+NAA0.1mg/L。
6.根据权利要求1所述的一种组织培养长穗火炬花的方法,其特征在于,所述的壮苗培养基的基础成分为蔗糖20-40g/L,琼脂3-8g/L,营养成分为MS+6-BA0.5-2.0mg/L+NAA0.1-0.2mg/L,壮苗培养基的pH值为5.5-6。
7.根据权利要求6所述的一种组织培养长穗火炬花的方法,其特征在于,所述的壮苗培养基的营养成分优选MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L。
8.根据权利要求1所述的一种组织培养长穗火炬花的方法,其特征在于,所述的生根培养基的基础成分为蔗糖20-40g/L,琼脂3-8g/L,营养成分为MS+NAA0.1-0.5mg/L+IBA1.0-5.0mg/L,生根培养基的pH值为5.5-6。
9.根据权利要求8所述的一种组织培养长穗火炬花的方法,其特征在于,所述的生根培养基的营养成分优选MS+NAA0.3mg/L+IBA3.0mg/L。
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