[发明专利]旋毛虫副肌球蛋白的补体功能相关抗原表位及抗体

说明书

技术领域

本发明属于免疫生物学领域，涉及旋毛虫副肌球蛋白的补体功能相关抗原表位及抗体。

背景技术

旋毛虫病（Trichinellosis）是一种常见的食源性人兽共患寄生虫病，严重危害人类健康和畜牧业生产。旋毛虫病呈世界性分布，目前在俄罗斯及东欧国家、拉美国家及泰国等地流行严重。据世界卫生组织（WHO）最新统计结果，1986～2009年间，有41个国家报道了旋毛虫病的流行，病例达65,818人（Murrell,K.D.and E.Pozio,Worldwide occurrence and impact of human trichinellosis,1986-2009.Emerg Infect Dis,2011.17(12):p.2194-202）。我国是世界上旋毛虫病危害最严重的国家之一，故该病不仅被列为我国三大食源性人兽共患寄生虫病之一，同时也是政府提出的让人民吃上“放心肉”的首检和必检的人兽共患病病种。伴随我国经济发展和生活水平提高，人们的饮食习惯和饮食谱也随之发生改变。近年来由于生食、涮、烤等食肉方式的多样化，加之人们越来越多地食用狗肉及野生动物肉类，使得我国旋毛虫病发病率呈上升趋势。2004～2009年间，仅西南三省就暴发旋毛虫病15起，总病例1,387人，死亡4人（Cui,J.,Z.Q.Wang and B.L.Xu,The epidemiology of human trichinellosis in China during 2004-2009.Acta Trop,2011.118(1):p.1-5）。卫生部“第二次全国人体重要寄生虫病现状调查”结果显示，旋毛虫病血清阳性率平均高达3.38%（抽样调查9.3万人血清）（许隆祺等,全国人体重要寄生虫病现状调查报告.中国寄生虫学与寄生虫病杂志,2005.23第5期增刊），某些流行区（云南）人群感染阳性率高达8.26%，提示当前我国旋毛虫病流行形势比较严峻。

副肌球蛋白（paramyosin）是多种无脊椎动物主要的结构蛋白，脊椎动物则无此蛋白（Gobert,G.N.and D.P.McManus,Update on paramyosin in parasitic worms.Parasitol Int,2005.54(2):p.101-7）。早期的研究认为副肌球蛋白的功能只是参与肌原纤维的聚集和粗肌丝的组装，在肌肉收缩机制中起作用(Elfvin,M.,R.J.Levine and M.M.Dewey,Paramyosin in invertebrate muscles.I.Identification and localization.J Cell Biol,1976.71(1):p.261-72)。旋毛虫的副肌球蛋白基因（Ts-Pmy GenBank accession No.:EF429310）全长为2996bp，其开放读码框架（ORF）2655bp，编码885个氨基酸，理论分子量为102kDa。

旋毛虫副肌球蛋白Ts-Pmy是一个具有前景的抗旋毛虫病疫苗候选抗原分子，将其免疫动物后可诱导产生Th1/Th2混合型免疫应答，产生的免疫保护力导致36.2%的肌幼虫减虫率（Yang,J.,et al.,Identification and characterization of a full-length cDNA encoding paramyosin of Trichinella spiralis.Biochem Biophys Res Commun,2008.365(3):p.528-33)。随后的研究发现：旋毛虫副肌球蛋白Ts-Pmy可分布在新生幼虫和成虫的肌层及体表；虫体体表的Ts-Pmy可与补体膜攻击复合物（membrane attackcomplex，MAC）中的重要组分C9结合，抑制C9聚合反应，进而阻碍宿主MAC的组装，使旋毛虫得以部分逃避宿主补体系统的杀伤；反之，用抗Ts-Pmy抗体封闭虫体体表的Ts-Pmy，则增强了宿主补体系统对虫体的杀伤效应，揭示了除可作为抗旋毛虫病疫苗候选抗原分子外，旋毛虫Ts-Pmy还具有免疫调节功能，参与虫体的免疫逃避作用（Zhang,Z.,et al.,Trichinella spiralis paramyosin binds to C8and C9and protects the tissue-dwelling nematode from being attacked by host complement.PLoS Negl Trop Dis,2011.5(7):p.e1225）。