[发明专利]一种日本血吸虫miRNA-bantam的类似物、组合物及其应用无效

专利信息
申请号: 201410022944.9 申请日: 2014-01-17
公开(公告)号: CN103805602A 公开(公告)日: 2014-05-21
发明(设计)人: 孙军;王素文 申请(专利权)人: 同济大学
主分类号: C12N15/113 分类号: C12N15/113;C12Q1/68
代理公司: 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 代理人: 叶敏华
地址: 200092 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 一种 日本 血吸虫 mirna bantam 类似物 组合 及其 应用
【权利要求书】:

1.一种日本血吸虫miRNA-bantam的类似物,其特征在于,指能够生成类似于miRNA-bantam序列的重组质粒或病毒载体或者是化学合成的类似miRNA-bantam的序列;其正义链如SEQ ID No:1所示,反义链如SEQ ID No:2所示。

2.一种组合物,其特征在于,包含权利要求1所述的日本血吸虫miRNA-bantam的类似物。

3.根据权利要求2所述的一种组合物,其特征在于,还包含能够要用的载体。

4.一种如权利要求1所述的日本血吸虫miRNA-bantam的类似物的应用,其特征在于,该类似物用于干预日本血吸虫基因的表达,具体为抑制日本血吸虫体性成熟发育无关基因的表达,而为性成熟发育相关基因的高效表达提供条件。

5.根据权利要求4所述的一种日本血吸虫miRNA-bantam的类似物的应用,其特征在于,该类似物用于干预日本血吸虫基因的表达时,具体方法如下:

(1)用日本血吸虫尾蚴感染小鼠后,在SPF级动物房饲养18天;

(2)用无菌预冷生理盐水从小鼠主动脉灌注,冲出18天童虫,在无菌生理盐水中洗涤2次后,用针转移;

(3)将童虫移入含无菌无血清1640培养液的孔板中,每孔放雌雄虫20对;

(4)刚转移来的童虫先用无菌无血清1640培养液洗涤2次,吸弃培养液,然后加入含20%兔血清的1640培养液,在37℃,5%CO2下培养1天;

(5)向童虫中加入日本血吸虫miRNA-bantam的类似物,每孔一次性加5ODRNA片段,40ul三抗,继续在37度,5%CO2培养箱中培养3天;

(6)3天后从孔板中取出雌虫,保存于100ul Trizol试剂中,-80保存备用,或者直接匀浆取RNA,对RNA进行分析。

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