[发明专利]一种日本血吸虫miRNA-bantam的类似物、组合物及其应用无效
| 申请号: | 201410022944.9 | 申请日: | 2014-01-17 |
| 公开(公告)号: | CN103805602A | 公开(公告)日: | 2014-05-21 |
| 发明(设计)人: | 孙军;王素文 | 申请(专利权)人: | 同济大学 |
| 主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12Q1/68 |
| 代理公司: | 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 | 代理人: | 叶敏华 |
| 地址: | 200092 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 日本 血吸虫 mirna bantam 类似物 组合 及其 应用 | ||
1.一种日本血吸虫miRNA-bantam的类似物,其特征在于,指能够生成类似于miRNA-bantam序列的重组质粒或病毒载体或者是化学合成的类似miRNA-bantam的序列;其正义链如SEQ ID No:1所示,反义链如SEQ ID No:2所示。
2.一种组合物,其特征在于,包含权利要求1所述的日本血吸虫miRNA-bantam的类似物。
3.根据权利要求2所述的一种组合物,其特征在于,还包含能够要用的载体。
4.一种如权利要求1所述的日本血吸虫miRNA-bantam的类似物的应用,其特征在于,该类似物用于干预日本血吸虫基因的表达,具体为抑制日本血吸虫体性成熟发育无关基因的表达,而为性成熟发育相关基因的高效表达提供条件。
5.根据权利要求4所述的一种日本血吸虫miRNA-bantam的类似物的应用,其特征在于,该类似物用于干预日本血吸虫基因的表达时,具体方法如下:
(1)用日本血吸虫尾蚴感染小鼠后,在SPF级动物房饲养18天;
(2)用无菌预冷生理盐水从小鼠主动脉灌注,冲出18天童虫,在无菌生理盐水中洗涤2次后,用针转移;
(3)将童虫移入含无菌无血清1640培养液的孔板中,每孔放雌雄虫20对;
(4)刚转移来的童虫先用无菌无血清1640培养液洗涤2次,吸弃培养液,然后加入含20%兔血清的1640培养液,在37℃,5%CO2下培养1天;
(5)向童虫中加入日本血吸虫miRNA-bantam的类似物,每孔一次性加5ODRNA片段,40ul三抗,继续在37度,5%CO2培养箱中培养3天;
(6)3天后从孔板中取出雌虫,保存于100ul Trizol试剂中,-80保存备用,或者直接匀浆取RNA,对RNA进行分析。
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