[发明专利]可乐定半抗原、抗原及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种可乐定半抗原，为式Ⅰ所示化合物：

式Ⅰ；

式Ⅰ所示化合物的制备方法，包括如下步骤：

将100mg阿可乐定和49mg乙醛酸溶于乙醇中，室温搅拌16h，减压浓缩，使用制备薄层色谱分离纯化，展开剂二氯甲烷：甲醇（V/V）=5:1，得白色固体，即为式Ⅰ所示的可乐定半抗原。

2.一种可乐定抗原，是将权利要求1所述的式Ⅰ所示化合物和载体蛋白偶联得到的偶联物。

3.权利要求2所述可乐定抗原的制备方法，包括如下步骤：

（1）取权利要求1所述的式Ⅰ所示化合物13mg，溶解于2mL二甲基甲酰胺中，磁力搅拌使其充分溶解；

（2）取步骤1溶液，加入17mg 1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亚胺（EDC）和15mgN-羟基琥珀酰亚胺（NHS），室温活化反应2h；

（3）称取载体蛋白50mg，加入0.1mol/L碳酸氢钠缓冲溶液4ml，搅拌使其充分溶解；

（4）将活化液加入到蛋白溶液中，室温反应过夜；

（5）用0.01mol/L的磷酸盐缓冲液于4℃透析3d，每天换3次透析液，以除去未反应的小分子物质；

（6）分装，于-20℃保存备用。

4.权利要求2所述可乐定抗原在制备可乐定特异性抗体中的应用。

5.应用权利要求2所述可乐定抗原制备得到的特异性抗体。

6.权利要求1所述可乐定半抗原、权利要求2所述可乐定抗原、权利要求5所述抗体在检测可乐定中的应用。

7.应用权利要求1所述可乐定半抗原、权利要求2所述可乐定抗原、权利要求5所述特异性抗体制备得到的酶联免疫检测试剂盒。

8.根据权利要求7所述的酶联免疫检测试剂盒，其特征在于包括：包被有可乐定抗原的酶标板、酶标抗体工作液、可乐定系列标准品、底物显色液、终止液、浓缩复溶液、浓缩洗涤液。