[发明专利]一种盐酸拓扑替康脂质体纳米制剂及其制备方法

说明书

本发明提供了一种盐酸拓扑替康脂质体纳米制剂的制备方法及通过该方法制备的盐酸拓扑替康脂质体纳米制剂，其中，所述方法包括如下步骤：a)将磷脂、胆固醇和修饰材料溶于乙醇得有机相，将该有机相注入到含梯度调节剂的水溶液中搅拌，经均质形成空白脂质体；b)采用切向流过滤的方法用去离子水将空白脂质体外水相中的离子梯度调节剂置换出来，形成空白脂质体内外水相的离子浓度梯度；c)取盐酸拓扑替康，与步骤b)形成的空白脂质体混合，在高于所述磷脂相转变温度的温度下孵化，得到盐酸拓扑替康脂质体纳米制剂。该方法操作简单、耗时较少、质量易控，适合工业化大量生产。

技术领域

本发明属于药品制剂领域，具体涉及一种盐酸拓扑替康脂质体纳米制剂的制备方法，以及通过该方法制备的盐酸拓扑替康脂质体纳米制剂。所述方法操作简单、耗时较少、质量易控，适合工业化大量生产。

背景技术

拓扑替康（Topotecan，TPT）是一种新型喜树碱半合成衍生物，对多种肿瘤，如非小细胞肺癌、肝癌、胃癌、血液淋巴瘤等均具有疗效，是DNA拓扑异构酶I(Topo I)的抑制剂，拓扑替康与其活性代谢产物通过与DNA-Topo-1复合体的稳定结合引起DNA单链的断裂，使DNA产生不可逆的损伤而死亡。

目前，国内上市的产品为盐酸拓扑替康的注射剂，该药抗癌活性强，作为常用的肿瘤化疗药物，骨髓抑制常见的毒性为3-4度中性粒细胞减少和血小板降低，常见不良反应为食欲下降、恶心、呕吐、脱发和疲乏等，这些不良反应给患者带了巨大的痛苦，大大限制了该药在临床上的使用。

纳米制剂技术在药物研究中的应用正是基于它能改变药物在制剂中的存在状态而使药物表现出缓控释性、靶向性，从而提高药物疗效、降低药物的毒副作用等。纳米制剂技术在药物研究中的应用大致可分为二方面，一是纳米药物粒子的制备，例如纳米结晶技术、超细粉碎(纳米级)技术等，使药物的粒径在1000nm以下；二是纳米药物载体的制备，纳米载药系统(nanoparticle delivery system，NDS)，使用于载药的载体尺寸在纳米级。由于肿瘤血管间隙可达到100-780nm，正常血管内皮细胞之间的间隙通常在2nm左右。静脉注射给药后，纳米制剂可有效穿透肿瘤区的血管，聚集在肿瘤区，更好发挥疗效，成为国际药剂学界研究的热点领域。大量的研究表明它在肿瘤治疗领域具有潜在的应用价值。

针对拓扑替康治疗肿瘤中出现的问题，已经制备了一种盐酸拓扑替康长循环脂质体，实现靶向给药，降低游离药物在人体内其他组织部位的分布，降低毒副作用，减少不良反应，大大提高了药物的治疗效果。

但是，盐酸拓扑替康是一种水溶性药物，采用薄膜分散法、乙醇注入法等常规方法制备脂质体时，药物不易进入脂质体内水相，致使包封率低。由于盐酸拓扑替康是两亲性弱碱性药物，适合采用离子梯度法制备脂质体制剂，即以离子梯度调节剂为水相制备空白脂质体，此时脂质体的内水相和外水相都含有等浓度的离子梯度调节剂，然后以去离子水置换外水相的离子梯度调节剂，造成脂质体内外调节剂的浓度梯度，再将温度提高到脂质体相变温度以上，依靠离子梯度调节剂浓度梯度的驱动，即主动载药，将盐酸拓扑替康载入脂质体内，能极大地提高药物在脂质体内的包封率。

在如上的制备过程中，一个关键的步骤就是置换外水相的离子梯度调节剂，引起脂质体内外调节剂的浓度梯度。目前，常用的方法是透析袋透析或葡聚糖凝胶G50洗脱分离。这两种方法存在的问题是处理量少，会稀释原脂质体的浓度，因此只适合实验室小量的应用，不适合大规模样品的处理。

常规过滤或者超滤的方法去除外水相离子梯度调节剂，建立离子梯度时存在随着过滤的进行，会出现过滤或者超滤效率下降的问题，切向流过滤的过滤方向跟滤液流动方向垂直，在以多孔膜作为过滤介质的过程中，剪切力抑制了溶质的沉积，保证了截留颗粒或者分子能够从溶液中分离，该方法受到压力、介质类型、膜材料、pH酸碱度以及粘度等因素的影响，目前在医药领域主要是应用于细胞收集、蛋白浓缩、蛋白脱盐、抗生素纯化等方面，本发明将其应用与脂质体外水相离子梯度调节剂的去除，在具有较大创新性的同时，能够满足工业化生产的要求。

发明内容