[发明专利]一种应用于海参、鲍鱼养殖的巨大芽孢杆菌组合物

说明书

技术领域

本发明涉及一种应用于海参、鲍鱼养殖的制剂，具体是由巨大芽孢杆菌制成的制剂在促进海参、鲍鱼的生长，提高海参、鲍鱼免疫力，提高饲料转化率中的应用。

背景技术

2006年底在全国爆发的大菱鲆药残事件给我们敲响了警钟。欧盟已于2006年全面禁止抗菌药作为饲料添加剂在养殖中的应用。为保证食品安全，美国等发达国家对肉类、海产品等抗菌药残留进行检测。随着中国加入世贸组织，名优产品出口被普遍看好。但由于国内养殖不科学使用抗生素等有害药物的现象严重，大大限制了产品的出口。开发抗菌药替代产品应用于养殖业是目前市场所需要的。

发明内容

本发明的目的是提供一种促进海参、鲍鱼的生长，提高海参、鲍鱼免疫力，提高饲料转化率的制剂，该制剂由巨大芽孢杆菌制成。

本发明制剂的制备优选是通过下述步骤实施的，但不局限于此制备工艺，公知的能实现的制备工艺均可以：采取含巨大芽孢杆菌的样品，然后将样品置于灭菌瓶内，4℃保存，研究时从中取一定量样品加入18mL灭菌的稀释液中，充分混匀，在无菌操作台内，进行10^-1、10^-2、10^-3、10^-4，10^-5，10^-6，10^-7梯度稀释，取10^-5，10^-6，10^-7三个稀释梯度，分别涂布于巨大芽孢杆菌选择性单菌落分离固体培养基上，置于培养箱内，30℃下培养48小时，选择长势良好的单菌落分别接种于巨大芽孢杆菌液体扩增培养基中，置于培养箱内，30℃下扩增培养48小时。将所得培养液离心(12000rpm)分离出菌体后，将菌体冷冻真空干燥，调制出各菌种的干燥菌粉，然后根据《伯杰细菌鉴定手册》、相关细菌鉴定文献或16S rRNA序列对比分析进行巨大芽孢杆菌菌种鉴定和毒性试验，将无毒性的巨大芽孢杆菌干燥菌粉按需要比例添加粘合剂、沸石粉等辅料制成颗粒剂、片剂、胶囊、散剂、粉剂或液体制剂等各种剂型，或制成兽药、饲料添加剂或水质净化剂，也可加入其他活菌或低聚果糖等低聚糖起到协同作用。

巨大芽孢杆菌选择性单菌落分离固体培养基优选但不局限于：纯化水1L，蛋白胨10.0g，葡萄糖20.0g，酵母粉10.0g，琼脂25.0g，调pH7.4，115℃，灭菌15分钟

巨大芽孢杆菌液体扩增培养基优选但不局限于：纯化水1L，蛋白胨5.0g，酵母粉1.0g，柠檬酸铁0.1g，氯化钠19.45g，氯化镁5.98g，硫酸钠3.24g，氯化钙1.8g，氯化钾0.55g，碳酸钠0.16g，溴化钾0.08g，氯化锶0.034g，硼酸0.022g，硅酸钠0.004g，氟化钠0.0024g，硝酸钠0.0016g，磷酸氢二0.008g，调pH7.4，121℃，灭菌15分钟。

为进一步具体说明本发明，发明人利用上述方法通过巨大芽孢杆菌选择性单菌落分离固体培养基分离鉴定出了无毒性的巨大芽孢杆菌，本发明所述巨大芽孢杆菌并不局限于为说明本发明所述的巨大芽孢杆菌，只要无毒性的巨大芽孢杆菌均是本发明所述，均在本发明的保护范围内。

本发明所述巨大芽孢杆菌优选但不限于巨大芽孢杆菌DHH16保藏编号CGMCC8550，巨大芽孢杆菌DHH52保藏编号CGMCC8564。

本发明实施说明中优选使用的巨大芽孢杆菌的细菌学性质，本发明并不局限本发明所述细菌学性质，只是为说明本发明的优选：

1、为说明本发明，本发明利用上述方法分离的巨大芽孢杆菌分别为巨大芽孢杆菌DHH16保藏编号CGMCC8550，巨大芽孢杆菌DHH52保藏编号CGMCC8564。

2、菌体和菌落形态

菌体形态：革兰氏染色为阳性。菌体细胞呈杆状，末端圆。单个或呈短链排列。1.2～1.5×2.0～4.0微米。芽孢1.0～1.2×1.5～2.0微米，椭圆形，中生或次端生。

菌落形态：在营养琼脂平板上，菌落为淡黄色，边缘整齐，表面光滑，凸状隆起。

3、生理生化鉴定，见表1。

表1，巨大芽孢杆菌生理生化特征

本发明所述的巨大芽孢杆菌指活生物个体。

本发明是以有效剂量的上述巨大芽孢杆菌作为主要活性成份，按照一定的制剂工艺，加入常规的赋形剂、调味剂、崩解剂、防腐剂、润滑剂、湿润剂、黏合剂、溶剂、增稠剂、增溶剂等辅料，制成任何一种适合于使用的剂型，如颗粒剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、液体制剂、粉剂等剂型。