[发明专利]一种霍乱弧菌分析分型试剂盒有效
申请号: | 201410014783.9 | 申请日: | 2014-01-13 |
公开(公告)号: | CN103757110A | 公开(公告)日: | 2014-04-30 |
发明(设计)人: | 葛斌文;罗芸;卢青;金大智;张政;周丽萍;葛海鹏;郭育林 | 申请(专利权)人: | 无锡中德美联生物技术有限公司;浙江省疾病预防控制中心 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04;C12R1/63 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 李纪昌;曹翠珍 |
地址: | 214174 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 霍乱弧菌 分析 试剂盒 | ||
1.一种霍乱弧菌分析分型试剂盒,其特征在于,包括有扩增如下霍乱弧菌的VNTR基因座所设计的引物:VC1650、VC0437、 VC0147、VCA0171 、VCA0283和VC1457。
2.根据权利要求1所述的霍乱弧菌分析分型试剂盒,其特征在于:各个基因座对应的引物是进行分组标记,第1组,VC1650、VC0437;第2组,VC0147、VCA0171;第3组,VCA0283、VC1457。
3.根据权利要求2所述的霍乱弧菌分析分型试剂盒,其特征在于:各组分别使用FAM、HEX、TAMRA中的一种进行标记,且各个组之间的标记色不同。
4.根据权利要求1所述的霍乱弧菌分析分型试剂盒,其特征在于,各个基因座对应的引物是:VC1650,SEQ ID NO.1~2;VC0437,SEQ ID NO.3~4;VC0147,SEQ ID NO.5~6;VCA0171,SEQ ID NO.7~8;VCA0283,SEQ ID NO.9~10;VC1457,SEQ ID NO.11~12。
5.根据权利要求4所述的霍乱弧菌分析分型试剂盒,其特征在于,各个基因座对应的引物在最终的扩增体系中的浓度是:SEQ ID NO.1~2,0.10μM;SEQ ID NO.3~4,0.15μM;SEQ ID NO.5~6,0.12μM;SEQ ID NO.7~8,0.21μM;SEQ ID NO.11~12,0.15μM。
6.根据权利要求1所述的霍乱弧菌分析分型试剂盒,其特征在于:还包括有等位基因分型标准物。
7.根据权利要求1所述的霍乱弧菌分析分型试剂盒,其特征在于:还包括有反应混合物10.0 μL、热启动Taq酶0.5 μL、sdH2O补足至25.0μL;所述的反应混合物中包括有:MgCl2 7.5mM,Tris-HCl buffer 125mM,KCl 125mM,dNTPs 7.5mM,BSA 2mg/ml。
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