[发明专利]基于磁性分离和量子点标记的汞中毒快速检测方法与试剂盒无效
申请号: | 201410014482.6 | 申请日: | 2014-01-13 |
公开(公告)号: | CN103698526A | 公开(公告)日: | 2014-04-02 |
发明(设计)人: | 黄沛力;孙湖泊;王萌萌;王吉龙 | 申请(专利权)人: | 首都医科大学 |
主分类号: | G01N33/577 | 分类号: | G01N33/577;G01N33/533;G01N21/64 |
代理公司: | 中科专利商标代理有限责任公司 11021 | 代理人: | 王旭 |
地址: | 100069 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 磁性 分离 量子 标记 汞中毒 快速 检测 方法 试剂盒 | ||
1.用于液体生物样品中汞的快速检测的试剂盒,所述试剂盒包含:
抗汞免疫纳米磁珠,所述抗汞免疫纳米磁珠通过将抗汞单克隆抗体与纳米磁珠经由共价键偶联制备;
双功能螯合剂;
牛血清白蛋白(BSA);
三乙胺(TEA);
生物素化的BSA抗体;和
链霉亲和素化的QDs。
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其中所述纳米磁珠是Fe3O4纳米磁珠。
3.根据权利要求1所述的试剂盒,其中所述纳米磁珠的粒径为280nm。
4.根据权利要求1所述的试剂盒,其中所述双功能螯合剂是p-SCN-Bn-CHX-A"-DTPA。
5.根据权利要求1所述的试剂盒,其中所述液体生物样品选自尿液或血液。
6.根据权利要求1所述的试剂盒,其中所述液体生物样品是尿液。
7.根据权利要求1所述的试剂盒,其中所述抗汞单克隆抗体利用汞免疫抗原制备,所述汞免疫抗原通过在三乙胺(TEA)的存在下将汞、双功能螯合剂(优选为p-SCN-Bn-CHX-A"-DTPA)和血蓝蛋白(KLH)混合来制备。
8.根据权利要求1所述的试剂盒,其中用于所述QDs的激发波长=488nm,并且用于所述QDs的发射波长=585nm。
9.基于磁性分离和量子点(QDs)标记的液体样品中汞的快速检测方法,所述方法包括:
1)制备抗汞单克隆抗体;
2)将所述抗汞单克隆抗体与纳米磁珠通过共价键偶联,制备抗汞免疫纳米磁珠;
3)向所述液体生物样品中加入双功能螯合剂(优选为p-SCN-Bn-CHX-A"-DTPA)、牛血清白蛋白(BSA)和三乙胺(TEA),进行温育,之后加入所述抗汞免疫纳米磁珠充分混合,之后进行磁分离,向磁分离得到的沉淀物中加入生物素化的BSA抗体和链霉亲和素化的量子点(QDs),使用荧光酶标仪进行荧光检测。
10.根据权利要求9所述的方法,其中所述纳米磁珠是Fe3O4纳米磁珠,其粒径优选为280nm。
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