[发明专利]鱼胶原蛋白提取过程中的定量检测方法及其应用在审
申请号: | 201410013117.3 | 申请日: | 2014-01-10 |
公开(公告)号: | CN103776778A | 公开(公告)日: | 2014-05-07 |
发明(设计)人: | 朱志伟;梁健华;曾庆孝;李汴生;张颖洁 | 申请(专利权)人: | 华南理工大学 |
主分类号: | G01N21/31 | 分类号: | G01N21/31;G01N1/28 |
代理公司: | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人: | 张燕玲;裘晖 |
地址: | 510640 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 鱼胶 蛋白 提取 过程 中的 定量 检测 方法 及其 应用 | ||
1.一种鱼胶原蛋白提取过程中的定量检测方法,其特征在于利用乙酸溶液配制胶原蛋白待测溶液,用天狼猩红染色后,离心,测定上清液的吸光度,对比标准曲线,定量胶原蛋白含量。
2.根据权利要求1所述的鱼胶原蛋白提取过程中的定量检测方法,其特征在于具体包括以下步骤:
(1)以乙酸溶液为溶剂配置胶原标准溶液,得到待测溶液,用天狼猩红染色,离心后收集上清液,沉淀用乙酸溶液复溶,离心再次得到上清液;合并两次上清液,测定在540nm处的吸光度,绘制标准曲线;
(2)样品的测定:取鱼胶原蛋白样品,以乙酸溶液为溶剂配置成饱和溶液,得到待测溶液,用天狼猩红染色,离心后,测定上层清液在540nm处的吸光度,对照标准曲线,定量胶原蛋白含量。
3.根据权利要求1所述的鱼胶原蛋白提取过程中的定量检测方法,其特征在于:所述乙酸溶液的浓度为0.3~0.8mol/L。
4.根据权利要求1所述的鱼胶原蛋白提取过程中的定量检测方法,其特征在于:所述乙酸溶液的浓度为0.5mol/L。
5.根据权利要求1所述的鱼胶原蛋白提取过程中的定量检测方法,其特征在于:所述天狼猩红的溶液浓度为65~75mg/L。
6.根据权利要求1所述的鱼胶原蛋白提取过程中的定量检测方法,其特征在于:所述天狼猩红溶液浓度为69mg/L。
7.根据权利要求1所述的鱼胶原蛋白提取过程中的定量检测方法,其特征在于:所述用天狼猩红染色具体操作为把天狼猩红溶液加入待测溶液中,混匀,室温静置10~40min染色。
8.根据权利要求1所述的鱼胶原蛋白提取过程中的定量检测方法,其特征在于:所用天狼猩红的量为每0.1ml待测溶液添加1mL天狼猩红溶液;所述的离心指在10000~15000r/min离心30min。
9.根据权利要求2所述的鱼胶原蛋白提取过程中的定量检测方法,其特征在于:步骤(1)所述配置胶原标准溶液采用大鼠皮肤I型胶原为胶原标准样品。
10.根据权利要求1~9任一项所述的鱼胶原蛋白提取过程中的定量检测方法在胶原提取过程中快速定量的应用。
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