[发明专利]一种用液相色谱法分离测定阿塞那平中间体有关物质的方法

说明书

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及液相色谱法分离测定阿塞那平中间体及其有关物质的方法。

背景技术

阿塞那平用于急性狂躁症或伴有/不伴有精神病症的I型双向情感障碍。阿塞那平由默克公司与欧加农生物技术公司共同开发,是通过对四环类抗抑郁药米安色林(mianserin)进行结构改造而发现的新型非典型抗精神病药。阿塞那平中间体化学名为11-Chloro-2-methyl-2,3-dihydro-8-oxa-2-aza-dibenzo[e,h]azulen-1-one，分子式为C₁₇H₁₂ClNO₂。阿塞那平中间体结构式为：

在合成该化合物的过程中，有几步重要的中间体可能会由于去除不完全而影响药物的纯度和质量，对于阿塞那平中间体的合成主要控制的有关物质有3个，分别是有关物质1 (5-Chloro-2-phenoxy-phenyl)-acetic acid、有关物质2 {[2-(5-Chloro-2-phenoxy-phenyl)-acetyl]-methyl-amino}-acetic acid methyl ester和有关物质3（3-(5-Chloro-2-phenoxy-phenyl)-1-methyl-pyrrolidine-2,4-dione，结构式分别为：

          

有关物质1                     有关物质2                         有关物质3

对于合成阿塞那平中间体中引入的杂质，在原料药中是需要进行质量控制的，因此，实现阿塞那平中间体及其有关物质的分离，在阿塞那平的合成及其质量控制方面具有重要的现实意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种分析阿塞那平中间体化学纯度以及分离其有关物质的方法，从而实现阿塞那平中间体与其有关物质的分离和测定，保证阿塞那平及含阿塞那平制剂的质量控制。

本发明所述的用液相色谱法分析阿塞那平中间体化学纯度以及分离其有关物质的方法，是采用辛烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以一定比例的无机盐缓冲溶液－有机相为流动相。

上述所说的色谱柱以辛烷基硅烷键合硅胶为填料，选自Kromasil-C₈或ES-C₈。

上述所说的有机相选自以下化合物：甲醇、乙腈、丙醇、异丙醇，优选为乙腈。

上述所说的方法，其流动相无机盐缓冲溶液-有机相采用等度洗脱。

上述所说的方法中，无机盐缓冲溶液中包含的无机盐选自磷酸盐、碳酸盐、柠檬酸盐，优选为磷酸盐，具体为磷酸二氢钾、磷酸二氢铵。

其中无机盐缓冲溶液中包含的无机盐的浓度为0.01～0.1mol/L，优选浓度为0.02mol/L。

本发明所述的分离测定方法，可按照以下方法实现：

1) 取阿塞那平中间体样品适量，用甲醇或流动相溶解样品，配制成每1mL含阿塞那平0.1～1.5mg的样品溶液。

2) 设置流动相流速为0.5～1.5mL/min ，流动相流速优选为1.0mL/min，检测波长为200～250nm，最佳检测波长为205nm，柱温箱温度为20～50℃，柱温箱温度最佳为25℃。

3) 取1)的样品溶液10～50μL，注入液相色谱仪，完成阿塞那平中间体与有关物质的分离测定。其中：

高效液相色谱仪的型号，无特别要求，本发明采用的色谱仪为岛津：LC-20AT， CBM-20A，SIL-20AC，SPD-M20A，CTO-10ASvp 

色谱柱：C₈（Kromasil，250×4.6 mm，5μm）

流动相： 0.02mol/L磷酸二氢钾缓冲溶液（称取磷酸二氢钾2.72g，加水溶解至1000ml，用稀磷酸溶液调pH 3.0）-乙腈（60:40）

流速：1.0 mL/min

检测波长：205 nm

柱温：25℃

进样体积：10μL

本发明采用C₈（Kromasil，250×4.6 mm，5μm），能够有效的分离阿塞那平中间体及其有关物质。本发明解决了阿塞那平及其有关物质的分离测定问题，从而确保了阿塞那平中间体原料药的质量可控（结果见附图1～7）。 

附图说明

图1为实施例1时的阿塞那平中间体及其有关物质HPLC图；