[发明专利]一种多花黑麦草组培快繁方法

权利要求书

1.一种多花黑麦草组培快繁方法，包括无菌实生苗的制备、无根系无菌分蘖丛生芽的制备、有根系无菌实生苗的制备和移栽，其特征在于：

所述无根系无菌分蘖丛生芽的制备方法为：在超净工作台内，选取健壮的无菌实生苗，并将其置于无菌培养皿中，在无菌条件下先剪去无菌实生苗的根系，然后在根茎结合处向上1cm的位置切割，得到茎基，将得到的茎基放于组培瓶内的生芽培养基表面，然后轻压，使根部没入生芽培养基中，然后盖紧组培瓶盖子；再将组培瓶置于温度为23～27℃，光照时间为16h/d，光强为1500~2000Lx的光照培养箱中培养20~35天后，单个茎基萌发出高6~10cm，数量为8~20个的分蘖丛生芽，得分蘖丛生芽，然后从中选取数量为18~48个的分蘖丛生芽作为无根系无菌分蘖丛生芽；

所述有根系无菌实生苗的制备方法为：在超净工作台内，取出制得的无根系无菌分蘖丛生芽，并置于无菌培养皿中，用灭菌过的医用手术刀切除丛生芽上部的多余叶片，留下长2~3cm的丛生芽，然后在分蘖节处纵向切割，将其分割成完整的单芽，然后将单芽根部向下轻放于组培瓶内的生根培养基表面，轻压使其根部没入培养基中，接种完后盖紧瓶盖，将接种后的组培瓶置于温度为23～27℃，光照时间为16h/d，光照强度为1500~2000Lx的光照培养箱中培养15~25天后，幼苗基部长出6~10根须根，得无菌实生苗。

2.根据权利要求1所述的一种多花黑麦草组培快繁方法，其特征在于：所述无菌实生苗的制备方法为选取完整成熟的黑麦草种子，放入自来水中浸泡0.5~1h，然后在超净工作台内，将黑麦草种子转移至无菌瓶内，先用体积百分比分数为75%的酒精将黑麦草种子消毒30~60s，再用无菌水冲洗2~3遍，之后放入质量百分比浓度为0.1%的升汞中浸泡消毒6~8min，用无菌水冲洗4~6遍后，得到无菌种子，在超净工作台内，将得到的无菌种子放入无菌培养皿中，在无菌条件下轻放于无菌基本培养基表面，然后轻压，使种子没入培养基中，接种完后盖紧组培瓶盖子，将组培瓶置于温度为23～27℃，光照时间为16h/d，光照强度为1000~2000Lx的光照培养箱中，培养20~35天后，得到高度为5~8cm的无菌实生苗。

3.根据权利要求1所述的一种多花黑麦草组培快繁方法，其特征在于：所述移栽的方法为将蛭石和草炭土按3:1的重量比混合，得混合基质，搅拌均匀后，备用；

从培养基中取出制备的的有根系的无菌实生苗，用清水洗掉根部残余的培养基，并置于混合基质中，使根系完全没入混合基质中，在温度为23～27℃，光照时间为16h/d，光照强度为1500~2000Lx的光照培养箱中培养7天后，再置于温度为23～27℃的玻璃温室中，在自然光照下培养6～7天后，即可成苗。