[发明专利]中药复方药物组合物的新用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种中药复方药物组合物的新用途，具体地，是在制备促使干细胞向生殖细胞分化的诱导液中的用途。

背景技术

近年来，由于环境污染严重、工作压力加大、饮食习惯改变、生殖系统疾病等因素对正常受孕造成不利影响，不孕症患者数量呈上升势头，发病率约为12.5%～15%，且有逐年增加趋势。因此世界卫生组织（WHO）宣布将不孕症与心血管病、肿瘤并列为当今影响人类生活和健康的三大主要疾病。自1978年全球首例试管婴儿诞生以来，以体外授精-胚胎移植（IVF-ET）为代表的辅助生殖技术（ART）的引入给不孕不育症的成功治疗提供了更大的可能。助孕的相关研究对于解决不孕不育患者的实际问题具有现实的意义。

体外受精（IVF）是指哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术。获取合格的卵子和精子，是体外受精的基础，目前，体外受精包括促排卵、卵泡检测与取卵、精子的优选与处理和体外受精步骤。诱发多个卵泡发育的促排卵是不孕治疗的重要基础，此环节早时使用自然周期排卵，但每一自然周期一般仅有一个卵泡成熟，提供卵子少，导致实施以后步骤困难，且妊娠率低，现已被超排卵技术所取代。然而，超排卵技术是指应用人类促性腺激素促进更多卵泡成熟排卵的一种技术，由于此过程多个同时发育，雌二醇增加，引起反馈性的黄体生成素（LH）峰出现，导致卵子早熟，质量差，妊娠率低，而且因药物过度使用引起的并发症，如卵巢过度刺激综合征(OHSS)、多胎妊娠、出生缺陷和表遗传学修饰异常等。因此，急需寻找其他方法，寻找合适的卵子和精子。

补肾中药介入辅助生殖技术，具有调经、助孕、促卵泡发育及排卵、提高卵细胞质量以及提高卵子受精率、促进早期胚胎发育的作用，已得到证实。如，公开号：102784267的专利申请公开了一个补肾复方，它包括熟地18-30份、山茱萸9-12份、山药8-16份、枸杞子9-12份、菟丝子8-16份、鹿角胶8-16份，其可以促卵母细胞体外成熟，治疗不孕症，但未见关于其影响干细胞分化为生殖细胞的相关报道。

发明内容

本发明的技术方案是提供了中药复方药物组合物的新用途。具体地，是在制备促使干细胞向生殖细胞分化的诱导液中的用途。

本发明含有下述重量配比的原料药在制备促使干细胞向生殖细胞分化的诱导液中的用途：熟地18-30份、山茱萸9-12份、山药8-16份、枸杞子9-12份、菟丝子8-16份、鹿角胶8-16份。

其中，所述原料药的重量配比如下：熟地24份、山茱萸9-12份、山药12份、枸杞子9-12份、菟丝子12份、鹿角胶12份。

其中，所述原料药的重量配比如下：熟地24份、山茱萸12份、山药12份、枸杞子12份、菟丝子12份、鹿角胶12份。

本发明促使干细胞向生殖细胞分化的诱导液，它以常用细胞培养基为基础培养基，添加有终浓度为2～20%（v/v）的含药血清；

所述含药血清按照如下方法制备：

（1）按照前述配比取原料药，制备成为超细粉，以5.0g/kg的剂量施用于鼠，施用方式为口服给药；

（2）给药30min、60min、90min后，眼底静脉丛取血，分别静置、离心得上清液，混匀，过滤除菌，即可。

常用细胞培养基，是指包含供给细胞营养和促使细胞增殖的基础物质的培养基，如，α-MEM培养基（又叫MEM培养基，Minimum Essential Medium）、DMEM-高糖培养基、DMEM-低糖培养基、RPMI-1640培养基、DMEM/F12培养基或M-199培养基。

优选地，所述诱导液中含药血清的终浓度为4.5～5%（v/v）。

其中，所述诱导液中还添加有终浓度为10～20%（v/v）的胎牛血清和/或1%（v/v）青链霉素。

青链霉素：即青霉素和链霉素的混合液，其中，青霉素的含量为10000U/ml，链霉素的含量为10mg/ml。

所述干细胞为胚胎干细胞或间充质干细胞。

本发明促使干细胞分化为生殖细胞的方法，步骤如下：取干细胞，置于前述的诱导液中培养至少21天，即可。

所述干细胞为胚胎干细胞或间充质干细胞。

本发明补肾复方可以促进干细胞向生殖细胞分化，为生殖细胞的体外构建提供了新方法，为试管婴儿领域开拓新思路、新途径，临床应用前景良好。

显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。