[发明专利]可控量子点位点特异性桥接偶联的抗体标记方法及其应用

权利要求书

1.一种可控量子点位点特异性桥接偶联的抗体标记方法，其特征在于，包括以下步骤：在量子点（10）表面偶联抗体亲和配体（30）；以及以所述抗体亲和配体（30）作为桥接分子与抗体（20）进行位点特异性自组装标记，其中，所述抗体亲和配体（30）包括用于与抗体（20）结合的抗体亲和蛋白或抗体结合肽序列（31）、用于与所述量子点（10）表面偶联的标签序列（33）以及提供所述抗体亲和蛋白或抗体结合肽序列（31）与所述标签序列（33）之间空间间隔的间隔臂序列（32）。

2.根据权利要求1所述的抗体标记方法，其特征在于，所述抗体亲和蛋白为蛋白G、蛋白A、蛋白A/G或蛋白L；所述抗体结合肽为人工合成的经肽库筛选的与所述抗体（20）特异性结合的多肽。

3.根据权利要求1所述的抗体标记方法，其特征在于，所述标签序列（33）包括含有4～12个组氨酸的组氨酸标签、含有1～5个半胱氨酸的半胱氨酸标签或含有生物素修饰的标签。

4.根据权利要求1所述的抗体标记方法，其特征在于，所述量子点（10）表面带有供与所述标签序列（33）偶联的标签序列配体。

5.根据权利要求4所述的抗体标记方法，其特征在于，所述配体包括配位金属离子或亲和素蛋白。

6.根据权利要求1所述的抗体标记方法，其特征在于，所述抗体（20）源自大鼠、小鼠、兔、羊、马、牛、猪或人。

7.根据权利要求1所述的抗体标记方法，其特征在于，所述抗体（20）包括通过免疫动物产生的多抗、杂交瘤方法制备的单抗、异源表达的单抗或基因工程抗体。

8.根据权利要求1所述的抗体标记方法，其特征在于，通过调节所述抗体（20）的浓度控制所述抗体（20）与所述抗体亲和蛋白或抗体结合肽的连接数量，并用酶解的所述抗体（20）片段封闭未结合的所述抗体亲和蛋白或抗体结合肽的结合位点。

9.根据权利要求1所述的抗体标记方法，其特征在于，所述抗体亲和蛋白或抗体结合肽与所述量子点（10）偶联摩尔比为1～200：1。

10.根据权利要求1所述的抗体标记方法，其特征在于，所述抗体（20）与所述量子点（10）偶联摩尔比为0.5～100：1。

11.根据权利要求1至10中任一项所述的可控量子点位点特异性桥接偶联的抗体标记方法在酶联免疫吸附、侧向免疫层析、细胞成像、流式细胞术、蛋白印迹中的应用。