[发明专利]一种蝴蝶兰防褐化组培方法及防褐化培养基

说明书

技术领域

本发明主要涉及植物组织培养领域，具体地说是一种蝴蝶兰防褐化组培方法及防褐化培养基。

背景技术

外植体褐变是植物组织培养中遇到的重要问题。有研究表明，导致褐化的主要原因是由多酚氧化酶作用于天然底物酚类物质形成醌而引起的，通过加入抗氧化剂和吸附剂可较好地控制褐化现象发生。

针对这些产生褐化的原因，早前有研究表明活性炭是能够起到防褐化的作用的，因为活性炭防褐化用的原理是活性炭的吸附作用，而活性炭本身吸附作用是有限的，也就是说每瓶中我们不可能加入大量的活性炭，所以小量的活性炭的吸附作用是比较小的，一旦吸附的有害成分达到饱和，基本上就没有功效了，因此在培养过程中需更换新鲜培养基，而植物的生长发育是连续的过程，对培养的内在小环境是有严格要求的，频繁更换培养基不利于培养基中的营养成分产生作用，且在转接过程中存在着污染的风险，高频率的转接会加大污染死亡的机率，也就说活性炭防褐化的作用有严重的缺陷。随后又有研究表明光照对初代培养的褐化是有影响的，结果表明，1000lx和3000lx光强培养可降低褐化率，2000lx光强培养的外植体褐化严重，差异显著。不难发现这些方法存在着一定的缺陷和不全面性且不环保，对于整个培养阶段的防褐化和一个比较系统的防褐化方法的研究还是甚少。

蝴蝶兰又名蝶兰（Phalaenopsis amabilis），兰科（Orchidaceae）蝶兰属(Phalaenopsis)多年生附生草本植物，有着“洋兰皇后”之称的蝴蝶兰，由于其花形如彩蝶飞舞，色彩艳丽，体态轻盈、飘逸，在国内外花卉市场上极受欢迎，一直都是消费者的宠儿。而且蝴蝶兰除了盆栽之外，还特别适宜用作切花，是艺术插花的高档花材。

“V31”是蝴蝶兰红花系列的一个品种，以超长的花梗长度，良好的花序排列，中庸的花形及花色，特别的花朵图案，博得广大生产者及消费者的欢迎，多年以来一直受到追捧，是蝴蝶兰中的佼佼者。但是兰科植物在组织培养过程中的褐化问题是多发的常见的，几乎不可避免，褐化会导致植株的死亡，也就是培养中的植物不能继续进行培养，所以防止褐化是在兰科植物组织培养中要极力解决的问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种蝴蝶兰防褐化组培方法，通过该方法可以对蝴蝶兰组织培养过程出现的褐化问题进行改善，提高存活率，增加健康的组培苗数量从而增加最终的产量。

本发明的目的还在于提供提供一种植物防褐化组织培养基；该培养基可以对植物组培过程中出现的褐化问题得到显著改善。

本发明解决技术问题采用如下方案：

一种植物防褐化组培培养基，其特点在于，各阶段培养基由如下组分组成：

（1）初代培养基

每升MS基本培养基中添加6-BA8.0mg、NAA0.5mg、金盏花提取液175mg、琼脂8g、蔗糖30g，培养基pH=5.6；或

每升N6基本培养基中添加6-BA8.0mg、NAA0.5mg、柠檬提取液150mg、琼脂8g、蔗糖30g，培养基pH=5.6；或

每升MS基本培养基中添加6-BA8.0mg、NAA0.5mg、西红柿提取液300mg、琼脂8g、蔗糖30g，培养基pH=5.6；或

每升MS基本培养基中添加BA8.0mg、NAA0.5mg、迷迭香提取液110mg、琼脂8g、蔗糖30g，培养基pH=5.6；

（2）增殖分化培养基

每升B5基本培养基中添加6-BA8.0mg、NAA0.5、金盏花提取液175mg椰汁150g、琼脂8g、蔗糖30g、培养基pH=5.6；或

每升N6基本培养基中添加+6-BA8.0mg、NAA0.5mg、柠檬提取液150mg、椰汁150g、琼脂8g、蔗糖30g，培养基pH=5.6；或

MS基本培养基中添加6-BA8.0mg、NAA0.5mg、西红柿提取液300mg、椰汁150g、琼脂8g、蔗糖30g，培养基pH=5.6；或

MS基本培养基中添加6-BA8.0mg、NAA0.5mg、迷迭香提取液110mg、椰汁150g、琼脂8g、蔗糖30g、培养基pH=5.6。

本发明同时提供一种蝴蝶兰防褐化组培方法，包括外植体消毒、初代培养和增殖分化培养，生根培养、炼苗和移栽，其特点在于，

所述初代培养是指：

将消毒处理的外植体接入权利要求1所述的初代培养基上，25±1℃、光照1500-2000Lx；光照时间为10-12小时/天，培养5-6周；

所述增殖分化培养是指：