[发明专利]一种D-阿洛酮糖 3-差向异构酶的68位和109位双突变体酶及其应用无效
申请号: | 201410001843.3 | 申请日: | 2014-01-03 |
公开(公告)号: | CN103849612A | 公开(公告)日: | 2014-06-11 |
发明(设计)人: | 江波;沐万孟;贾敏;张涛;黄敏;周榴明 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N9/90 | 分类号: | C12N9/90;C12N15/61;C12N15/63;C12R1/145 |
代理公司: | 无锡市大为专利商标事务所(普通合伙) 32104 | 代理人: | 时旭丹;刘品超 |
地址: | 214122 江苏省无锡市滨湖区蠡湖*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 阿洛酮糖 差向异构 68 109 突变体 及其 应用 | ||
1.一种功能改善的D-阿洛酮糖 3-差向异构酶DPE的突变体酶Y68I/G109P,其特征在于将来源于梭状芽孢杆菌(Clostridium bolteae)ATCC BAA-613的D-阿洛酮糖 3-差向异构酶进行突变所得的突变体酶;将原来DPE基因中的68位的酪氨酸Tyr和109位的甘氨酸Gly分别替换为异亮氨酸Ile和脯氨酸Pro,命名为Y68I/G109P。
2.根据权利要求1所述的DPE的突变体酶Y68I/G109P,其特征在于与野生型DPE酶相比,所述DPE的突变体酶Y68I/G109P的热稳定性获得提高,以在55℃下的半衰期t50来表示热稳定性,DPE的突变体酶Y68I/G109P的半衰期为78.3min,是野生型DPE酶的1.8倍;所述DPE的突变体酶Y68I/G109P的催化活性获得提高,与野生菌相比,其Km值降低,kcat/Km得到提高;
。
3.一种重组表达质粒,其特征在于其中含有权利要求1所述DPE的突变体酶Y68I/G109P基因。
4.一种表达宿主,其特征在于其被权利要求3所述的重组表达质粒转化。
5.权利要求1所述DPE的突变体酶Y68I/G109P的应用,其特征在于在化学、食品和制药领域中的应用。
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