[发明专利]从外周血中产生肿瘤反应性T细胞富集群的方法

权利要求书

1.获得富集肿瘤反应性T细胞的细胞群的方法，所述方法包括：

(a)从外周血样本中获得外周血单个核细胞(PBMCs)的混合群；

(b)从混合群中特异地选择还表达PD-1和/或TIM-3的CD8⁺ T细胞；和

(c)将(b)中选择的细胞与未被选择的细胞分离，以获得富集肿瘤反应性T细胞的细胞群。

2.获得包含富集肿瘤反应性T细胞的细胞群的药物组合物的方法，所述方法包括：

(a)从外周血样本中获得外周血单个核细胞(PBMCs)的混合群；

(b)从混合群中特异地选择还表达PD-1和/或TIM-3的CD8⁺ T细胞；

(c)将(b)中选择的细胞与未被选择的细胞分离，以获得富集肿瘤反应性T细胞的细胞群；和

(d)将富集肿瘤反应性T细胞的细胞群与药学上可接受的载体组合，以获得包含富集肿瘤反应性T细胞的细胞群的药物组合物。

3.如权利要求1或2中任一项所述的方法，其中(b)包括从所述混合群中特异地选择表达TIM-3的CD8⁺ T细胞。

4.如权利要求1或2所述的方法，其中(b)包括从所述混合群中特异地选择表达PD-1的CD8⁺ T细胞。

5.如权利要求1或2所述的方法，其中(b)包括从所述混合群中特异地选择为(i)TIM-3⁺/PD-1⁺、(ii)TIM-3^-/PD-1⁺或(iii)TIM-3⁺/PD-1^-的CD8⁺ T细胞。

6.如权利要求1或2所述的方法，其中获得所述富集肿瘤反应性T细胞的细胞群而没有进行自体肿瘤识别的筛选。

7.如权利要求1或2所述的方法，其中在(b)之前，未对所述T细胞混合群进行非特异性刺激。

8.如权利要求1或2所述的方法，其还包括将(c)中获得的富集细胞群中的T细胞的数量进行扩增。

9.如权利要求1或2所述的方法，其还包括在存在TWS119、白介素-21(IL-21)、IL-12、IL-15、IL-7、转化生长因子(TGF)β以及AKT抑制剂(AKTi)中的任何一种或多种的情况下，培养(c)中获得的富集细胞群。

10.如权利要求1或2所述的方法，其还包括用肿瘤抗原和/或用自体肿瘤T细胞刺激(c)中获得的富集细胞群。

11.如权利要求1或2所述的方法，其还包括用核苷酸序列转导或转染(c)中获得的富集群中的细胞，所述核苷酸序列编码IL-12、IL-7、IL-15、IL-2、IL-21、mir155以及抗PD-1siRNA中的任何一种或多种。