[发明专利]用于治疗神经变性的细胞疗法有效
| 申请号: | 201380075366.9 | 申请日: | 2013-02-06 |
| 公开(公告)号: | CN105072914B | 公开(公告)日: | 2018-09-21 |
| 发明(设计)人: | 托马斯·N·蔡斯;佐佐木经世;古贺三奈子 | 申请(专利权)人: | NC医学研究公司 |
| 主分类号: | A01N63/00 | 分类号: | A01N63/00;C12N5/071;C12N5/00 |
| 代理公司: | 北京市金杜律师事务所 11256 | 代理人: | 陈文平 |
| 地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 用于 治疗 神经 变性 细胞 疗法 | ||
1.一种制备用于治疗由缺血引起的神经变性的异质性骨髓细胞亚群的方法,其包括:
a)以未处理的人骨髓的形式提供骨髓细胞群;
b)将所述骨髓细胞群以105个细胞/cm2至106个细胞/cm2的低密度接种在塑料表面上;
c)洗涤所述接种的细胞群以除去未附着的细胞;
d)在含血清的培养基中将来自所述洗涤的细胞群的所述附着的细胞培养至接近汇合;
e)将所述培养的细胞在含血清的培养基中连续传代不超过七次连续传代,其中,在每次传代时,以750个细胞/cm2的低密度接种所述培养的细胞;和
f)获得所述异质性骨髓细胞亚群,其中所述异质性骨髓细胞亚群治疗由缺血引起的神经变性。
2.根据权利要求1所述的方法,其中所述含血清的培养基是含胎牛血清的培养基。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述未处理的人骨髓从没有使用化疗剂进行预治疗的受试者获得。
4.根据权利要求3所述的方法,其中所述化疗剂是5-氟尿嘧啶。
5.根据权利要求3所述的方法,其中所述骨髓细胞群不能通过密度分离法或通过ACK裂解液来分离。
6.根据权利要求5所述的方法,其中所述密度分离法需要FicollTM或PercollTM梯度。
7.根据权利要求1所述的方法,其还包括在由缺血引起的神经变性实验模型中测试所述异质性骨髓细胞亚群,其中只选择显示治疗由缺血引起的神经变性的能力的那些群,并且其中所述由缺血引起的神经变性实验模型是氧/葡萄糖剥夺(OGD)细胞培养模型。
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