[发明专利]痤疮的治疗和预防

说明书

发明背景

痤疮

普通痤疮(Acne Vulgaris)是常见的影响所有年龄，种族和性别的皮肤病况。流行高峰在青少年中是百分之80-90，但超过十几岁仍持续出现，特别是在女性中。痤疮由于毛囊的堵塞而发展。被称为微粉刺的角质化过度和角蛋白和皮脂的堵塞的形成是最早的改变。微粉刺可以扩大以形成开放粉刺(黑头)或封闭粉刺(白头)。在这些条件下，大量的共生菌痤疮丙酸杆菌(Propionibacterium acnes)可能会引起导致炎性病变(丘疹和脓疱)的炎症。增加皮脂产生的激素活性，如青春期和月经期可能会促使痤疮的形成。

目前用于痤疮的治疗包括局部过氧化苯甲酰，局部和口服类视黄酸，局部和口服抗生素以及用于女性的口服激素。但是，很多各种各样的不良事件与这些治疗有关：从使用局部类视黄酸时的皮肤干燥，红肿和刺激，到使用抗生素时产生抗生素抗性，到使用口服类视黄酸时的出生缺陷，以及到使用激素时体重增加和血栓。因此需要目前治疗方案的更安全的备选方案。

乳铁蛋白

乳铁蛋白是天然存在于牛奶中的蛋白质。美国食品和药物管理局和欧洲食品安全局将乳铁蛋白分类为GRAS(一般认为安全的)，用作功能性食品的成分。乳铁蛋白表现出抗微生物性，抗氧化性和抗炎症性。

从脱脂奶或从奶酪乳清商购得到牛乳铁蛋白。理解从脱脂奶和奶酪乳清分离的乳铁蛋白之间的区别对于理解现有技术是重要的。牛奶蛋白大致分为酪蛋白和乳清。牛奶蛋白是80％的酪蛋白，酪蛋白是具有4.6的等电点的相关磷蛋白(αsl，αs2，β，κ)家族的名称。酪蛋白相对疏水，使其在水中难溶。酪蛋白以称为酪蛋白胶束的颗粒悬浮液发现于奶中，包裹在可溶性κ-酪蛋白分子中。酪蛋白在奶的pH为约6.6-6.8时携带负电荷。

牛奶蛋白是20％的乳清蛋白，其是不依赖pH的可溶的球状蛋白的集合。乳清蛋白包括β-乳球蛋白，α-乳白蛋白和血清白蛋白。这些乳清蛋白具有低于6.6——奶的pH以下的等电点，这意味着它们在奶中作为带负电的蛋白质存在。

牛奶中有两种具有高于6.8等电点的微量蛋白。一种是乳铁蛋白，其是具有报道7.8-8.7的等电点的80kda的蛋白，以及具有9.6的等电点的乳过氧化物酶。乳铁蛋白可以直接从脱脂奶分离。首先，通过离心从全脂奶中去除脂肪以制造脱脂奶。将在6.6-6.8的自然pH的脱脂奶过滤并应用于阳离子交换色谱，如羧甲基(CM)-Sephadex，其去除了带正电的乳铁蛋白和乳过氧化物酶。用洗脱乳过氧化物酶的低浓度(1.6％)NaCl溶液将柱洗涤。随后用高浓度(5％)NaCl溶液洗脱乳铁蛋白。将乳铁蛋白通过超滤浓缩并通过渗滤从NaCl分离。低热处理后，冻干乳铁蛋白以制造粉末。从脱脂奶制备的乳铁蛋白基本上不含其他乳清蛋白。下面，我们将会把直接源自脱脂奶的乳铁蛋白称为“源自脱脂奶的乳铁蛋白”。

也可以从作为来自奶酪生产的废料的奶酪乳清中分离乳铁蛋白。通过向全脂奶加入用于酸化的产生乳酸的细菌和粗制凝乳酶(rennet)来制造硬奶酪，如cheddar奶酪。酸化和粗制凝乳酶的联合作用将奶凝聚为固体(凝乳)和液体(乳清)。凝乳主要是脂肪和酪蛋白蛋白。乳铁蛋白最终在乳清中。

粗制凝乳酶是从小牛胃得到的酶的复合物。粗制凝乳酶含有多种酶，包括蛋白酶凝乳酶和胃蛋白酶，以及脂肪酶。凝乳酶是特异性水解κ酪蛋白的Phel05-106Met中的肽键的天冬氨酸蛋白酶，其去除稳定酪蛋白胶束的κ-酪蛋白的亲水部分，导致酪蛋白凝聚。κ-酪蛋白的亲水部分是最终为乳清的称为糖巨肽(glycomacropeptide)的具有64个氨基酸的蛋白。已报道糖巨肽是抗细菌的，抗病毒的和抗炎的。

在奶酪制造期间使用乳酸菌和粗制凝乳酶的处理也能产生一组蛋白质，统称为朊间质(proteose)蛋白胨，其来源于酪蛋白和乳清蛋白的蛋白水解和水解。朊间质蛋白胨是最终在奶酪制造期间的乳清中的热稳定且酸溶性的蛋白。基本上通过以上对于源自脱脂奶的乳铁蛋白描述的相同方法将来自乳清的乳铁蛋白纯化。由于从蛋白水解和水解产生的额外的碱性蛋白，纯化可能更困难并且可能需要额外的步骤。

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