[发明专利]用于HIV预防和治疗的聚糖修饰的抗-CD4抗体

说明书

本发明公开了具有N‑连接聚糖类连接至可变区的聚糖修饰的抗‑CD4单克隆抗体。本发明还公开了用于生产此类抗体的表达载体和细胞株，和此类抗体在HIV预防和治疗的用途。本发明一般而言涉及HIV的预防和治疗。本发明一般而言还涉及抗体的聚糖修饰。具体而言，本发明涉及用于HIV预防和治疗的聚糖修饰的抗‑CD4抗体。

技术领域

本发明一般而言涉及HIV和治疗。本发明一般而言还涉及抗体的聚糖修饰。具体而言，本发明涉及用于HIV预防和治疗的聚糖修饰的抗-CD4抗体。

背景技术

HIV-1藉由病毒包膜(Env)糖蛋白gp120与T细胞受体CD4结构域1(D1) 交互作用的驱使进入体内。Ibalizumab(iMab)是一种有效及广域的HIV-1 中和性Ab(Jacobson etal.,Antimicrob.Agents Chemother.53:450-457,2009； Kuritzkes et al.,J.Infect.Dis.189:286-291,2004)，其主要藉由与宿主T细胞 CD4受体结构域2(D2)结合以中和HIV，因而阻断HIV利用这些CD4受体进入T细胞并产生感染的能力(Burkly et al.,J.Immunol.149:1779-178, 1992)。在最近的一大组基础分离株(118株包膜假型病毒)的检测中，以抑制50％感染为定义时，ibalizumab中和所有病毒的92％，而以抑制90％感染为定义时，中和47.4％的病毒。虽然ibalizumab可有效抑制大范围的HIV 分离株，但是有明显一部分的HIV变体仍可逃脱ibalizumab的抑制。近来的报告指出，HIV第一型包膜可变区5的天门冬酰胺酸连结聚糖化位点的丧失与ibalizumab之抗性有关(Toma et al.,J.Virology85(8):3872-2880,2011； Pace et al.,J.Acquir.Immune Defic.Syndr.出版前之电子版本：2012年9月)。

抗体恒定区之保留位置会被聚糖化，而连接至所述恒定区的聚糖类的存在及结构可影响抗体的活性(请见Wright and Morrison,TIBTECH 15: 26-32,1997之回顾)。

有报告指出，以N-连结糖导入重链而非轻链造成改进的溶解度 (Pepinsky etal.,Protein Sci 19,954-966,2010；Wu,et al.,Protein Eng Des Sel 23,643-651,2010)。在Pepinsky之文献中，修饰位于恒定区而非可变区。然而，先前的研究并未提供策略性地以聚糖置于抗体可变区的功效。

发明内容

本发明提供一种以轻链可变区的醣修饰增强单克隆抗体活性的新颖方法。在本发明之各具体实施方式中，提供适于生产所述抗体的聚糖修饰的抗-CD4单克隆抗体、表达载体及细胞株，以及所述抗体在HIV预防和治疗之用途。

一方面，本发明提供一种聚醣修饰的抗-CD4抗体，其具有一个或一个以上的N-连结聚糖类连接至该抗体之可变区。在本发明的一些具体实施方式中，该N-连结聚糖类连接至抗体之轻链可变区。所述聚糖类的连接是经由在该抗体可变区的一个或一个以上的工程化N-链接聚糖化位点而达成。