[发明专利]染料的光敏化化学漂白

权利要求书

1.一种探测生物样品中的多靶标的方法，其包括：

(a) 使至少一个探针结合存在于包含多靶标的生物样品中的一个或多个靶标；

(b) 检测来自步骤(a)中结合的至少一个探针的信号；

(c) 使包含步骤(a)的结合探针的样品与电子转移试剂和防止以下步骤(d)中靶标修饰的添加剂接触；

(d) 照射步骤(c)的样品；

(e) 使至少一个探针结合存在于步骤(d)的样品中的一个或多个靶标；和

(f) 检测来自步骤(e)中结合的探针的信号，

其中所述探针包含光信号发生器，和其中防止靶标修饰的添加剂是自由基清除剂或单线态氧的淬灭剂，

其中电子转移试剂是由以下结构式表示的硼酸盐：

,

其中：

R₁、R₂和R₃各自独立地是烷基、烯基、炔基、芳基或杂芳基，其中所述烷基、烯基、炔基、芳基或杂芳基任选地被一个或多个选自以下的取代基取代：(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、(C1-C4)烷基氨基、氨基、羟基、氰基、卤素或硝基，

R₄是烷基、烯基或炔基，其中所述烷基、烯基或炔基任选地被一个或多个选自以下的取代基取代：(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、(C1-C4)烷基氨基、氨基、羟基、氰基、卤素或硝基，和

M⁺选自有机和无机阳离子。

2.权利要求1的方法，其中步骤(b)中检测到的信号是光信号。

3.权利要求2的方法，其中步骤(a)的探针包含荧光信号发生器，和步骤(b)中检测到的信号是荧光信号。

4.权利要求1的方法，其中步骤(d)中照射样品在pH 5-9的缓冲剂的存在下进行。

5.权利要求1的方法，其中步骤(d)中照射样品通过使样品暴露于350 nm - 1.3 μM波长的光而完成。

6.权利要求5的方法，其中步骤(d)中照射样品通过使样品暴露于400-700 nm波长的光而完成。

7.权利要求1的方法，其中R₁、R₂和R₃各自是任选取代的芳基和R₄是任选取代的烷基。

8.权利要求7的方法，其中R₁、R₂和R₃各自为未取代的苯基和R₄为未取代的丁基，和硼酸盐为三苯基丁基硼酸盐。

9.权利要求1的方法，其中所述探针是形态学染色剂。

10.权利要求3的方法，其中电子转移试剂是高水溶性硼酸盐。

11.权利要求10的方法，其中高水溶性硼酸盐是四正丁基硼酸盐、苯基-三-2-(4-甲氧基PEG(10)甲基苯基)乙基硼酸盐或二苯基-双-2-(4-(甲氧基PEG(10)甲基)苯基)乙基硼酸盐。

12.权利要求1的方法，其中步骤(c)-(f)重复一次或多次。

13.权利要求1的方法，其中步骤(c)和(d)进行100毫秒至15分钟。

14.权利要求1的方法，其还包括在步骤(d)之后，用有效从样品中去除残余电子转移试剂的洗涤溶液洗涤样品。

15.权利要求14的方法，其中所述洗涤溶液包含促成剂，其中所述促成剂是指加入洗涤溶液中而有助于在去除信号后从样品去除残余电子转移试剂的物质。