[发明专利]用于分析白细胞的试剂、体系及方法有效
申请号: | 201380072181.2 | 申请日: | 2013-12-20 |
公开(公告)号: | CN104981692B | 公开(公告)日: | 2019-09-20 |
发明(设计)人: | 吴炯 | 申请(专利权)人: | 雅培实验室 |
主分类号: | G01N33/50 | 分类号: | G01N33/50 |
代理公司: | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 11038 | 代理人: | 崔锡强 |
地址: | 美国伊*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 分析 白细胞 试剂 体系 方法 | ||
1.一种使用自动血液分析仪进行白血细胞(WBC)分析的方法,所述方法包括:
(a)用WBC分析试剂稀释全血样品,其中所述WBC分析试剂包含:
溶于有机溶剂中的膜可渗透的荧光染料,其中所述膜可渗透的荧光染料标记所述样品中的多个含核细胞;
渗透压调节组分,其当使用所述血液分析仪分析时将多个WBC亚群彼此分离,其中所述渗透压调节组分为浓度范围为0.1%至0.5%的氯化铵;和
WBC保护剂;
(b)在范围为30℃至50℃的温度下孵育步骤(a)的稀释血样小于25秒的孵育时间;
(c)将来自步骤(b)的经孵育的样品递送至所述血液分析仪的流动池;
(d)当来自步骤(c)的经孵育的样品穿过所述流动池时,使用激发源将所述经孵育的样品激发;
(e)收集来自被激发的样品的多个光散射信号和至少一个荧光发射信号;和
(f)基于在步骤(e)中收集的所有所述信号进行WBC差异分析,同时基于所述至少一个荧光发射信号仅使用荧光阈值排除对所述稀释血样内的不满足荧光阈值的任何颗粒的考虑。
2.根据权利要求1所述的方法,其中所述激发源具有350nm至700nm的波长。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述荧光发射信号通过带通滤光器或长通滤光器在360nm至750nm的波长下收集。
4.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述膜可渗透的荧光染料为吖啶橙、碘化己锭、SYTO RNA Select、SYTO 12或SYTO 14。
5.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述试剂中的膜可渗透的荧光染料的浓度范围为0.0001%至0.0005%。
6.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述试剂中的膜可渗透的荧光染料的浓度为0.01μM至15μM。
7.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述渗透压调节组分还包括氯化钠。
8.根据权利要求7所述的方法,其中所述氯化钠的浓度范围为0.1%至0.5%。
9.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述WBC保护剂为甲醛、戊二醛、丁氧基乙醇、苯氧基乙醇或异丙醇。
10.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述WBC保护剂的浓度范围为0.1%至1.0%。
11.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述WBC分析试剂还包含表面活性剂。
12.根据权利要求11所述的方法,其中所述表面活性剂为皂角苷。
13.根据权利要求11所述的方法,其中所述表面活性剂的浓度范围为0.01%至0.05%。
14.根据权利要求12所述的方法,其中所述表面活性剂的浓度范围为0.01%至0.05%。
15.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述试剂还包含pH缓冲组分。
16.根据权利要求15所述的方法,其中所述pH缓冲组分为醋酸钠或碳酸氢钠。
17.根据权利要求15所述的方法,其中所述pH缓冲组分的浓度范围为0.01%至0.5%。
18.根据权利要求16所述的方法,其中所述pH缓冲组分的浓度范围为0.01%至0.5%。
19.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述试剂还包含抗微生物剂。
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