[发明专利]重组腺病毒及其用途

说明书

关于联邦资助研究的声明

本发明在受美国国立卫生研究院(NIH)授予的政府支持下完成，批准号为AI078526、AI096040和OD011170。政府在本发明中具有一定权利。

发明背景

重组腺病毒载体已经在疫苗的研发中使用。至今，已鉴别出约55种不同的腺病毒血清型。亚组C腺病毒已被最广泛地研究用于如疫苗接种和基因治疗的应用。具体地讲，腺病毒血清型2和5(Ad2和Ad5)广泛用于该领域。重要的是，基于Ad5载体的疫苗已显示在各种各样的动物模型中引发有效且具保护性的免疫反应。此外，关于使用基于Ad5的重组载体的HIV疫苗接种的大规模临床试验正在进行(参见，例如WO01/02607；WO02/22080；希沃尔等人，自然，415:331-335,2002(Shiveretal.,Nature.415:331-335,2002)；赖特文等人，免疫学年评，20:73-99,2002(Letvinetal.,Annu.Rev.Immunol.20:73-99,2002)；以及希沃尔和伊米妮，医学年评，55:355,2004(ShiverandEmini,Annu.Rev.Med.55:355,2004))。

然而，基于重组Ad5载体的疫苗用于HIV和其他病原体的有效性可能由于人类群体中已存在的较高的抗Ad5免疫力而受到限制。在小鼠和猕猴研究中，抗Ad5免疫力的存在与基于Ad5的疫苗的免疫原性的降低有关联。1期临床试验的早期数据显示此问题也可能在人类中出现。虽然Ad5特异性中和抗体(NAb)和CD8⁺T淋巴细胞两者都引起抗Ad5免疫力，但似乎Ad5特异性NAb在此过程中起到主要作用(苏米达等人，病毒学杂志，174:7179-7185,2004(Sumidaetal.,J.Virol.,174:7179-7185,2004))。

因此，在本领域中存在未满足的对于具有低血清阳性率和有效免疫原性的替代性腺病毒载体的需要。

发明概述

已鉴别出三种新型猿猴腺病毒(sAd)sAd4287、sAd4310A和sAd4312的完整基因组，并且确定了它们的完整基因组。这些腺病毒表现出出人意料地低的血清阳性率和有效的免疫原性两者，这表明这些病毒可以用作新型疫苗载体候选物。在第一方面，本发明的特征在于分离的多核苷酸，分离的多核苷酸包括与SEQIDNOs:1-3中任一个的全部或一部分，或其互补序列至少90％一致(例如，至少91％、92％、93％或94％一致)、至少95％一致(例如，至少96％、97％、98％或99％一致)或100％一致的核苷酸序列。SEQIDNOs:1、2和3分别是野生型sAd4287、sAd4310A和sAd4312的全长基因组序列。本发明的分离多核苷酸可以包括参考多核苷酸分子(例如，SEQIDNOs:1-3)的至少5、6、7、8、9、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、2000、3000、4000、5000、6000、7000、8000、9000、10000、15000、20000、25000、30000或35000或更多个连续或非连续的核苷酸。