[发明专利]新型抗原结合蛋白及其作为定位产品用于治疗癌症的用途

说明书

技术领域

本发明涉及能够结合蛋白Axl的新型抗原结合蛋白，尤其是单克隆抗体，以及编码所述蛋白的氨基酸和核酸序列。根据一个方面，本发明涉及能够结合Axl并通过诱导Axl的内在化而被内在化到细胞中的新型抗原结合蛋白或抗原结合片段。本发明还包括所述抗原结合蛋白作为缀合有其它抗癌化合物(如毒素、放射性元素或药物)的定位产品的用途，及其用于治疗某些癌症的用途。

背景技术

“Axl”(也称为“Ufo”、“Ark”或“Tyro7”)克隆自患有慢性粒细胞白血病的患者，当由鼠NIH3T3过度表达时，作为致癌基因而引发转化。其属于受体酪氨酸激酶(RTK)家族，称为TAM(Tyro3、Axl、Mer)家族，其包括Tyro3(Rse、Sky、Dtk、Etk、Brt、Tif)、Axl以及Mer(Eyk、Nyk、Tyro-12)(Lemke G.等人Nat.Rev.Immunol.(2008)8,327-336)。

人蛋白Axl是894个氨基酸的蛋白质，其序列呈现于SEQ ID NO.29所列的序列中。氨基酸1-25对应着信号肽，不含所述信号肽的人蛋白Axl呈现于SEQ ID NO.30所列的序列中。

Gas6最初作为生长停滞特异性基因而被分离，是TAM家族成员的常见配体(Varnum B.C.等人Nature(1995).373,623-626)。Gas6呈现出对Axl最高的亲和性，其次是Tyro3，最后是Mer(Nagata K等人J.Biol.Chem.(1996).271,30022-30027)。Gas6由如下组成：介导对磷脂膜结合的富含γ-羧基谷氨酸(Gla)的结构域、4个表皮生长因子样结构域以及2个层粘连蛋白G样(LG)结构域(Manfioletti G.,Brancolini,C,Avanzi,G.&Schneider,C.Mol.Cell Biol.(1993)13,4976-4985)。对于许多其它RTK，配体的结合导致受体二聚化和酪氨酸残基的自身磷酸化(对于受体Axl而言，酪氨酸残基779、821和866)，其作为各种细胞内信号传导分子的停靠位点(Linger R.M.,Keating,A.K.,Earp,H.S.&Graham,D.K.Adv.Cancer Res.(2008).100,35-83)。此外，Axl受体可通过配体非依赖性过程被激活。当Axl受体过度表达时，可发生这种激活。

Gas6/Axl信号传导已被证明调节各种细胞过程，包括大量各种细胞的体外细胞增殖、黏附、迁移和存活(Hafizi S.&Dahlback,B.FEBS J.(2006).273,5231-5244)。此外，TAM受体参与先天免疫的控制；它们抑制树突细胞(DC)和巨噬细胞中对病原体的炎症反应。它们还驱动凋亡细胞被这些免疫细胞的吞噬作用，且其是自然杀伤(NK)细胞的成熟和杀伤活性所需要的(Lemke G.等人Nat.Rev.Immunol.(2008).8,327-336)。

其在正常细胞中弱表达，且主要见于成纤维细胞、髓系祖细胞、巨噬细胞、神经组织、心肌和骨骼肌中，在其中主要支持细胞的存活。Gas6/Axl系统通过调节血管平滑肌细胞的动态平衡在血管生物学中发挥重要作用(Korshunov,V.A.,Mohan,A.M.,Georger,M.A.&Berk,B.C.Circ.Res.(2006).98,1446-1452；Korshunov,V.A.,Daul,M.,Massett,M.P.&Berk,B.C.Hypertension(2007).50,1057-1062)。

在肿瘤细胞中，Axl在调节细胞的侵袭和迁移中起重要作用。Axl的过度表达不仅与预后不良相关，也与乳腺、结肠、食管癌、肝细胞、胃、胶质瘤、肺、黑色素瘤、骨肉瘤、卵巢、前列腺、横纹肌肉瘤、肾、甲状腺和子宫内膜癌中所报告的各种人类癌症的侵袭性增加相关(Linger R.M.,Keating,A.K.,Earp,H.S.&Graham,D.K.Adv.Cancer Res.(2008).100,35-83以及Verma A.Mol.Cancer Ther.(2011).10,1763-1773，综述)。在乳癌中，Axl似乎是上皮至间质转化(EMT)强大的效应因子；EMT过程积极促进生物体中癌细胞的迁移和传播(Thiery J.P.Curr.Opin.Cell Biol.(2003).15,740-746)。