[发明专利]用于捕获生物活性剂的细胞标靶的组合物和方法

权利要求书

1.一种系统，包括：

(a)生物活性剂的细胞标靶；

(b)第一捕获蛋白和第二捕获蛋白的二聚物；

(c)束缚至第一捕获配体的所述生物活性剂，其中所述第一捕获 配体与所述第一捕获蛋白基于其相互作用形成共价键；以及

(d)展示第二捕获配体的固体表面，其中所述第二捕获配体与所 述第二捕获蛋白基于其相互作用形成共价键。

2.如权利要求1所述的系统，其中所述细胞标靶在细胞内表达 为与报告分子的融合体。

3.如权利要求2所述的系统，其中所述报告分子是生物发光报 告分子。

4.如权利要求3所述的系统，其中所述生物发光报告分子包含 与SEQ ID NO.：3具有至少70％序列同一性的多肽。

5.如权利要求1所述的系统，其中所述第一捕获蛋白和第二捕 获蛋白二者都包含与SEQ ID NO.：1的至少70％序列同一性。

6.如权利要求5所述的系统，其中所述二聚物是同二聚物。

7.如权利要求1所述的系统，其中所述生物活性剂是小分子。

8.如权利要求1所述的系统，其中所述细胞标靶是所述生物活 性剂的结合配偶体。

9.如权利要求1所述的系统，其中所述第一捕获配体和第二捕 获配体包含相同的分子结构。

10.如权利要求1所述的系统，其中所述固体表面选自由以下组 成的清单：孔、管、载片、板、树脂或珠。

11.如权利要求10所述的系统，其中所述固体表面是磁性的或 顺磁性的。

12.如权利要求1所述的系统，其中所述细胞标靶结合至所述生 物活性剂，所述第一捕获蛋白结合至所述第一捕获配体，并且所述第 二捕获蛋白结合至所述固体表面上的所述第二捕获配体。

13.一种捕获细胞标靶的方法，包括以下步骤：

(a)在使所述细胞标靶结合生物活性剂的条件下，将束缚至第一 捕获配体的所述生物活性剂施用至包含所述生物活性剂的细胞标靶 的细胞；

(b)裂解所述细胞以产生细胞裂解物；

(c)在所述第一捕获配体与第一捕获蛋白形成共价键的条件下， 使所述细胞裂解物与所述第一捕获蛋白和第二捕获蛋白的二聚物接 触；

(d)在所述第一捕获配体与所述第一捕获蛋白形成共价键的条 件下，使所述细胞裂解物与展示第二捕获配体的固体表面接触；以及

(e)从所述细胞裂解物分离所述固体表面。

14.一种捕获细胞标靶的方法，包括以下步骤：

(a)在使所述细胞标靶结合生物活性剂的条件下，将束缚至第一 捕获配体的所述生物活性剂施用至包含所述生物活性剂的细胞标靶 的细胞；

(b)裂解所述细胞以产生细胞裂解物；

(c)使所述细胞裂解物与展示结合至第一捕获蛋白和第二捕获蛋 白的二聚物的第二捕获配体的固体表面接触，其中所述第二捕获蛋白 与所述第二捕获配体共价结合；以及

(d)从所述细胞裂解物分离所述固体表面。

15.如权利要求13和14中的一项所述的方法，其中所述细胞标 靶是与报告蛋白的融合体。

16.一种细胞的细胞裂解物，包含：

(a)生物活性剂的细胞标靶；以及

(b)束缚至第一捕获配体的生物活性剂；

所述细胞裂解物还包含：

(c)第一捕获蛋白和第二捕获蛋白的二聚物，其中所述第一捕获 配体与所述第一捕获蛋白基于其相互作用形成共价键；以及

(d)展示第二捕获配体的固体表面，其中所述第二捕获配体与所 述第二捕获蛋白基于其相互作用形成共价键。

17.如权利要求16所述的细胞裂解物，其中所述细胞标靶是与 报告蛋白的融合体。