[发明专利]赋予玉蜀黍对玉米根虫Il的抗性的组合物和方法

权利要求书

1.一种增强植物对昆虫害植食性的抗性的方法，包括：

(a)向可再生植物细胞中引入重组DNA构建体，所述重组DNA构建体包含有效连接到至少一个调控序列的多核苷酸，其中所述多核苷酸编码具有这样的氨基酸序列的多肽，所述氨基酸序列基于Clustal W比对方法与SEQ ID NO：2、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、20、22和23相比具有至少80％的序列同一性；以及

(b)在步骤(a)后从所述可再生植物细胞再生出转基因植物，其中所述转基因植物在其基因组中包含所述重组DNA构建体并表现出与不包含所述重组DNA构建体的对照植物相比增强的对植物害虫的抗性。

2.根据权利要求1所述的方法，还包括：

(c)获得源自所述转基因植物的子代植物，其中所述子代植物在其基因组中包含所述重组DNA构建体并表现出与不包含所述重组DNA构建体的对照植物相比增强的对昆虫害虫植食性的抗性。

3.根据权利要求1所述的方法，其中所述昆虫害虫为鞘翅目(Coleopteran)昆虫。

4.根据权利要求1所述的方法，其中所述昆虫害虫为鳞翅目(Lepidopteran)昆虫。

5.根据权利要求1所述的方法，其中所述植物为单子叶植物。

6.根据权利要求5所述的方法，其中所述单子叶植物为玉蜀黍。

7.一种鉴定赋予植物对昆虫害虫植食性的增强抗性的Crw2变体的方法，所述方法包括以下步骤：

a.通过基因改组将一个或多个核苷酸序列合并，所述一个或多个核苷酸序列编码SEQ ID NO：2的一个或多个片段，或与SEQ ID NO：2具有至少70％同一性的蛋白质或其片段；

b.将来自步骤(a)的所述改组序列转化进可再生植物细胞的群体；

c.从步骤(b)的转化的可再生植物细胞的群体再生出转化植物的群体；

d.从来自步骤(c)的转化植物的群体筛选对所述昆虫害虫增强的抗性；以及

e.从所述转化植物中鉴定出表现所述增强的抗性的变体。

8.根据权利要求7所述的方法，其中所述方法还包括以下步骤：

f.向可再生植物细胞引入重组构建体，所述重组构建体包含通过权利要求7所述的方法鉴定出的Crw2变体；

g.在步骤(f)后从所述可再生植物细胞再生出转基因植物，其中所述转基因植物在其基因组中包含所述重组DNA构建体；以及

h.选择(g)的转基因植物，其中所述转基因植物包含所述重组DNA构建体并表现出与不包含所述重组DNA构建体的对照植物相比增强的对所述昆虫害虫的抗性。

9.根据权利要求7或8所述的方法，其中所述昆虫害虫为鞘翅目(Coleopteran)昆虫。

10.根据权利要求7或8所述的方法，其中所述昆虫害虫为鳞翅目(Lepidopteran)昆虫。

11.根据权利要求7或8所述的方法，其中所述植物为单子叶植物。

12.根据权利要求11所述的方法，其中所述单子叶植物为玉蜀黍。

13.一种鉴定玉蜀黍植物中的Crw2等位基因变体的方法，其中所述等位基因变体与对昆虫害虫植食性的抗性增强相关，所述方法包括以下步骤：

a.获得玉蜀黍植物的群体，其中所述玉蜀黍植物表现出对所述昆虫害虫的不同抗性水平；

b.关于编码包含SEQ ID NO：2的蛋白质的多核苷酸序列、或在调控编码所述蛋白质的多核苷酸的表达的基因组区中评价等位基因变异；

c.将等位基因变异与所述抗性相关联；以及

d.鉴定出与对所述昆虫害虫的抗性增强相关联的等位基因变体。

14.根据权利要求13所述的方法，其中所述昆虫害虫为鞘翅目(Coleopteran)昆虫。

15.根据权利要求13所述的方法，其中所述昆虫害虫为鳞翅目(Lepidopteran)昆虫。