[发明专利]猪流感血球凝集素与神经氨酸酶变体

说明书

发明背景

相关申请的交叉引用

本申请要求于2012年11月16日提交的美国申请号61/727,213的优先权。本临时申请的披露通过引用以其全部内容结合在此。

发明背景

由猪起源的H1N1流感病毒导致的2009年流感大流行蔓延至超过215个国家并且引起至少18,000例实验室确认的死亡(加滕(Garten)等人，2009，科学(Science)325:197-201，31)。在这样的一种大流行的情况下，快速生产疫苗是至关重要的。然而，人类流感病毒在作为产生流感疫苗病毒的基质的鸡胚中的生长典型地被病毒对结合人类受体的偏好性(相对于鸟类受体)所阻碍。因此，通常需要卵适应以改善疫苗病毒在卵中的生长(甘巴良(Gambaryan)等人，1989第175-218页，在R.克鲁格(R.Krug)(编辑)的流感病毒(The Influenza Viruses)中，普雷纳姆出版社(Plenum Press)，纽约；罗伯森(Robertson)1993医学病毒学评论(Reviews in Med.Virol.)3:97-106；罗伯森等人，1987病毒学(Virol.)160:31-37；罗杰斯(Rogers)等人，1983自然(Nature)304:76-78)。在2009年4月H1N1大流行开始时，H1N1pdm疫苗的开发便已经被病毒在卵中的这样的不良生长所阻碍(罗伯森(Robertson)等人，2011疫苗(Vaccine)29:1836-1843)。

为了产生对抗猪源H1N1流感病毒的减毒活流感疫苗(LAIV)，改变了HA蛋白中的三个残基(K119E、A186D、D222G，全部是H1编号)。这些改变产生了在美国市场可获得的作为第一种H1N1pdm疫苗的LAIV。LAIV自从2003年已经在美国得到许可并且已经在其他国家(包括韩国和加拿大)得到批准(安布罗斯(Ambrose)等人，2008流感及其他呼吸道病毒(Influenza Other Respi Viruses)2:193-202)。每种LAIV病毒都是一种6:2重配体，该重配体包含来自主供体病毒的6个内部蛋白基因区段和来自野生型病毒的抗原血球凝集素(HA)和神经氨酸酶(NA)表面糖蛋白基因区段，该主供体病毒赋予温度敏感(ts)、冷适应(ca)和减毒(att)表型(墨菲(Murphy)等人，2002病毒免疫学(Viral Immunol)15:295-323)。

甲型/加利福尼亚/7/2009(A/California/7/2009)(CA/09)样H1N1pdm病毒自从2009便一直流通并且已经取代了季节性H1N1病毒作为存在于每年的流感疫苗中的H1N1株。尽管当前流通的H1N1病毒在抗原性上类似于CA/09，但是已经在新的H1N1pdm株中鉴定了CA/09遗传多样性和CA/09内的亚组(CDC通讯)。另外，获得自动物模型的数据证明通过改变序列或与其他流感病毒进行重配可以产生更具毒力的H1N1pdm(伊利希纳(Ilyshina)等人，2010 mBio 1:e00249-10；斯科劳温(Schrauwen)等人，2011新发传染病(Emerging Infectious Diseases)17；叶(Ye)等人，2010 PLoS病原学(PLoS Pathog.)6:e1001145)。因此，重要的是在H1N1pdm病毒中鉴定出可以促进在卵中快速产生高产率病毒的遗传标签。