[发明专利]防风草酸的药物组合物及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种化合物防风草酸(Anisomelic acid，AA)的新用途，所述防风草酸从Anisomeles malabarica分离得到。特别是，本发明涉及防风草酸的药物组合物。本发明还公开了防风草酸及其组合物在抗病毒癌症治疗中的用途。

背景技术

宫颈癌是第二常见的影响全世界妇女的恶性肿瘤，每年诊断出约500,000例新病例，以及280,000例死亡。虽然外科手术和化学-放射疗法能治愈80-95％的早期癌症妇女以及60％和60％的局部晚期癌症，疾病的复发和转移仍然是癌症死亡的主要原因。目前的用于晚期和转移性癌症的细胞毒素治疗的可选方案显示出了一般程度的结果，即最大30％的响应速率以及小于10个月的总体存活数。在传统疗法的成功率有限的情况下，对于宫颈癌的其他治疗可选方案的兴趣已增加。

大多数宫颈癌由一系列高风险的“瘤原性的”人类乳头瘤病毒(HPV)类型感染引起，目前公认超过99％的宫颈癌起始于HPV的感染。持续性HPV感染导致后续的不同等级的宫颈非典型增生和宫颈癌。与宫颈癌相关的主要高危基因型是HPV16和HPV18，这两个共同导致约70％的宫颈癌。

HPV病毒基因组的整合以及E6和E7病毒蛋白的表达是这种癌症发展的关键步骤。E6蛋白对营养防御应答的消除通过几种重要的机制发生。最好地被描述的机制涉及肿瘤抑制物p53的失活和降解。E6通过与称为E6相关蛋白(E6-AP)的细胞蛋白形成复合物来破坏p53的肿瘤抑制物功能。结果，失去了G1/S和G2/M的细胞周期检查点，并且细胞容易会基因组不稳定，这可能导致瘤的发展。

高危E6也激活端粒酶，所述端粒酶阻止端粒侵蚀并允许宿主细胞继续通过多轮分裂而不破坏DNA。也有报道称在HPV16E6永久人口腔黏膜角质细胞和初级人气道上皮细胞中，E6激活细胞核因子κB(NF-κB)而导致凋亡抑制蛋白2(IAP2)的表达加强。还发现c-IAP2的消耗导致细胞死亡，这暗示HPV 16诱导的c-IAP2表达对于永久表型维持是必要的。

在HPV感染中表达非常早的第二个基因是E7。E7蛋白是进入宿主细胞后维持病毒基因组的关键蛋白，最重要的功能之一是它与细胞蛋白中的视网膜母细胞瘤肿瘤抑制物(Rb)家族结合的能力。E7通过结合以及瞄向用于降解的蛋白体来刺激pRb的磷酸化和失活。然后E2F转录因子被释放以携带肿瘤细胞进入S期。E7与p21Cip和p27Kip相互作用，这样来干扰其抑制细胞周期蛋白-周期蛋白依赖性蛋白激酶(cyclin-cdk)的活性以及接下来的细胞周期的能力。因此，E7蛋白在适于病毒复制的细胞环境的维持中起着非常重要的作用。

对于可以治疗或改善癌症的痛苦的药剂的持续寻找过程中，天然产品提供了源源不断的活性化合物的供应，其越来越多地被利用。几种来源于植物的化合物目前已成功的用于癌症的治疗中。

防风草酸是从Anisomeles malabarica(L.)R.Br分离的双萜类化合物，所述Anisomeles malabarica(L.)R.Br是一种属于唇形科(Labiatae)的草本植物。这种植物通常叫做Malabar catmint，其在古代医学中被推荐用于黏膜炎、间歇热、肠道疾病和癌症。植物的含水醇类(50％)提取物已经显示出具有抗癌活性。

到目前为止，防风草酸本身没有被暗示或用于抗病毒癌症的治疗。

发明内容

本发明是基于AA在HPV16阳性的宫颈癌细胞中显示出诱导细胞凋亡的良好效果的发现。其在非宫颈癌细胞和非癌的MEF细胞中不能有效地诱导细胞凋亡。

出乎意料的是，发现AA抑制E6和E7的蛋白表达水平，因此其能够作为抗HPV剂起作用。

发明人还发现AA诱导p53非依赖性的细胞凋亡，其主要是通过细胞凋亡抑制蛋白2(cIAP2)的下调，从而引起细胞凋亡半胱天冬酶的内在激活。

与本发明相关的获得的结果揭示了AA为具有新的作用机制的化合物，其在宫颈癌细胞中，修复p53介导的生长抑制以及诱导细胞凋亡。

在发明人的知识范围内，这是第一次公开AA作为病毒肿瘤蛋白表达的抑制剂以及作为用于人类乳头瘤病毒(HPV)诱导的瘤的化疗剂。由于癌症中的E6/E7肿瘤蛋白和cIAP2蛋白作用的普遍重要性，所述化合物及其衍生物能被更广泛地用于抗癌和抗病毒的疗法中。

基于这些发现，本发明提供了防风草酸及其盐的药物组合物用于哺乳动物(包括人类和动物)的抗癌治疗中，特别是宫颈癌中。