[发明专利]用于预防猪水肿病的疫苗

说明书

本发明的目的是对预计发生猪水肿病的农场提供可以预防猪水肿病的疫苗。满足该目的的疫苗是具有卷曲螺旋形成单元的多肽与Stx2eB结合而得的融合蛋白或所述融合蛋白的多聚体，通过用该疫苗对猪免疫，能够诱导高效中和抗体并抵御猪水肿病的发病。

技术领域

本发明涉及用于预防猪水肿病的疫苗。更具体而言，所述疫苗包含使具有卷曲螺旋形成单元的多肽与作为导致猪水肿病的毒素的Stx2e的B亚基(Stx2eB)融合而得的重组蛋白和/或所述重组蛋白的多聚体作为活性成分。通过对猪接种该融合蛋白和/或多聚体，能够诱导高效毒素中和抗体，该疫苗能预防水肿病的发病。

背景技术

猪水肿病多发于4至12周龄的幼猪，导致眼睑浮肿、神经症状等，大部分在发病后24小时以内死亡(非专利文献1，Proc.Jpn.Pig Vet.Soc.2006,48,7-13)。猪水肿病的死亡率高达50至90％，并且由于复发、发育不良等导致生产能力降低，因此经济损失巨大。本疾病由与肠道粘附的产志贺毒素大肠杆菌(Shiga toxin producing E.coli，STEC)产生的志贺毒素Stx2e为原因而发病。Stx2e为AB₅型毒素蛋白，由具有rRNA N-糖苷酶活性的A亚基(Stx2eA)和具有受体(globotetraosyl ceramide(Gb4))结合能力的B亚基5聚体(Stx2eB)构成。已知的是，从肠道被导入且通过B亚基而到达诸如血管内皮细胞的细胞的表面的Stx2e将A亚基向靶细胞的胞质内递送，阻碍核糖体的蛋白合成，从而诱发水肿病的症状。在日本，用于预防猪水肿病的疫苗尚未市售，虽然也使用抗生素，但是发病后的给药变得为时已晚的情况多。此外，也报告了耐药菌的出现，因此期望有效的预防方法和治疗方法的开发。

基于这样的背景，我们研究了能有效地预防猪水肿病的方法。例如，采用Stx2e类毒素免疫的实验例对实验感染显示防御效果(非专利文献2，Vet.Microbiol.1991,29,309-318)。然而，在其他报告中，由于去毒化困难，因此一些猪在类毒素免疫后仍观察到水肿病的发病(非专利文献3，Infect.Immun.1992,60,485-90)。此外，报告了将Stx2eA的氨基酸序列的一部分修饰而去毒化的重组Stx2e对猪免疫时，确认了中和抗体诱导产生的例子(非专利文献3，Infect.Immun.1992,60,485-90)。然而，由重组大肠杆菌产生去毒化Stx2e的产生量极低，实用性方面存在问题。

现有技术文献

专利文献

专利文献1:日本特开2008-50344

非专利文献

非专利文献1:Proc.Jpn.Pig Vet.Soc.2006,48,7-13

非专利文献2:Vet.Microbiol.1991,29,309-318

非专利文献3:Infect.Immun.1992,60,485-90

非专利文献4:Adv.Protein Chem.2005,70,37-78

非专利文献5:Infect.Immun.2005,7,5654-65

非专利文献6:Infect.Immun.2011,79(10),4260-4275

发明内容

发明所要解决的技术问题

本发明所要解决的技术问题是对预计发生猪水肿病的农场提供能够有效地预防猪水肿病的疫苗。

用于解决技术问题的手段

本发明的发明人为了解决上述技术问题而进行了深入研究，结果发现，通过将使具有卷曲螺旋形成单元的多肽和Stx2eB融合而得的蛋白作为疫苗对猪接种，能诱导高效毒素中和抗体，从而完成了本发明。