[发明专利]用于转化麦角肽碱的酶及其方法

权利要求书

1.用于转化、特别是水解裂解麦角肽碱的酶，其特征在于，所述酶是在环醇环处水解裂解麦角肽碱的α/β-水解酶。

2.根据权利要求1的酶，其特征在于，所述酶包含由亲核氨基酸、组氨酸和酸性氨基酸组成的催化三联体，并且所述三联体被包含于具有α/β-水解酶折叠的肽链中。

3.根据权利要求2的酶，其特征在于，所述催化三联体由亲核氨基酸丝氨酸、组氨酸和酸性氨基酸天冬氨酸或谷氨酸之一组成，并且所述三联体被包含于具有α/β-水解酶折叠的肽链中。

4.根据权利要求1、2或3的酶，其特征在于，所述α/β-水解酶包含具有序列Gly-Gln-Ser-Arg-Asn-Gly的亲核肘。

5.根据权利要求1-4中任一项的酶，其特征在于，与序列ID No.1具有至少96％的序列同一性。

6.根据权利要求5的酶，其特征在于，特别是具有序列ID No.3的酶。

7.根据权利要求5的酶，其特征在于，特别是具有序列ID No.1的酶。

8.根据权利要求5的酶，其特征在于，是具有不同于序列ID No.1的N-或C-末端的序列、特别是延长的N-或C-末端的序列，特别是序列ID No.3或序列ID No.5的酶。

9.用于酶促转化麦角肽碱的方法，其特征在于，所述麦角肽碱在环醇环处被水解裂解为初级代谢物。

10.根据权利要求9的方法，其特征在于，所述裂解是通过环醇环的C3’-原子上的亲核攻击实现的。

11.根据权利要求9或10的方法，其特征在于，所述环醇环的C3’-原子上的亲核攻击是通过催化三联体实现的，所述催化三联体被包含于具有α/β-水解酶折叠的肽链中并由亲核氨基酸丝氨酸、组氨酸和酸性氨基酸天冬氨酸或谷氨酸之一组成。

12.根据权利要求9、10或11的方法，其特征在于，由所述麦角肽碱的环醇环的水解裂解形成的初级代谢物被进一步发生反应。

13.根据权利要求12的方法，其特征在于，所述初级代谢物的进一步反应是通过自发化学反应实现的。

14.根据权利要求12或13的方法，其特征在于，在所述初级代谢物的进一步反应中形成麦角酰胺。

15.根据权利要求12、13或14的方法，其特征在于，所述初级代谢物的进一步反应是通过在反应介质中存在的酶实现的。

16.用于生产对麦角肽碱进行代谢、特别是对麦角肽碱进行解毒的酶的方法，其特征在于，将编码根据权利要求1－8任一项的基因克隆入表达载体、转化入原核和/或真核宿主细胞并且在宿主细胞中表达。

17.根据权利要求16的方法，其特征在于，具有序列ID No.2、4或6的基因被用作所述基因。

18.根据权利要求16或17的方法，其特征在于，将所述基因转化入作为宿主细胞的选自巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)、大肠杆菌(E.coli)或枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的微生物中并在其中进行表达。