[发明专利]用于LAL反应物质测试的向心微流体平台

说明书

技术领域

本发明针对确定流体样本中的LAL反应物质的浓度的领域，以及更具体来说，本发明涉及用于测量流体样本中的LAL反应物质的浓度的向心微流体平台和盘。

本申请享有临时专利申请序号61/710908(2012年10月8日提交，标题为“MICROFLUIDIC BACTERIA ENDOTOXIN TESTING METHOD AND APPARATUS”、临时专利申请序号61/710990(2012年10月8日提交，标题为“CENTRIPETAL MICROFLUIDIC PLATFORM FOR BACTERIAL ENDOTOXIN TESTING”、临时专利申请序号61/710898(2012年10月8日提交，标题为“SENSITIVE AND RAPID METHOD FOR DETECTION OF LOW LEVELS OF ENDOTOXINS USING LAL REAGENTS”以及临时专利申请序号61/710903(2012年10月8日提交，标题为“MICROPLATES PRELOADED WITH ENDOTOXIN DETECTION REAGENTS WITH CALIBRATION MEANS”的权益。通过引用将上述申请全部结合到本文中。

背景技术

诸如革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌、酵母菌和真菌之类的微生物污染可引起人类的严重疾病甚至死亡。当人们受到革兰氏阴性细菌感染时，细菌可产生发热诱导细菌内毒素。内毒素对人类会是危险并且甚至是致命的。内毒素分子是革兰氏阴性细菌的细胞壁的脂多糖成分，其能够存在于药物剂型和医疗装置的表面，而与微生物污染无关。即使系统通过了无菌测试，内毒素污染也能够发生，这就是要求单独内毒素测试的原因。

当前，开发了多种测试，以便使用来自马蹄蟹的血细胞溶菌产物来检测样本中或样本上的内毒素的存在。当血细胞溶菌产物暴露于内毒素时，凝结将发生。血细胞溶菌产物是从各种马蹄蟹物种(包括Limulus（鲎）、Tachypleus（东方鲎）和Carcinoscorpius（圆尾鲎）物种)的血淋巴所产生的变形细胞溶菌产物。常用变形细胞的溶菌产物从Limulus或Tachypleus物种的血淋巴来产生，称作Limulus变形细胞溶菌产物(“LAL”)。使用LAL作为测试试剂的例行测试包括凝胶凝结检验、终点浊度检验、动力浊度检验、终点生色检验和动力生色检验。使用LAL试剂的测试也可用来对某些类型的葡聚糖测试真空污染的标记。

关于所使用的LAL检验和标准的更多信息可见于美国药典(“USP”)第85章“Bacterial Endotoxins Test”(“BET”)、日本药典4.01“Bacterial Endotoxin Test”、欧洲药典2.6.14“Bacterial Endotoxins”以及其他等效国家药典。附加国际协调药典信息能够见于ICH Q4B附录14“Bacterial Endotoxin Test General Chapter”。对于医疗装置中的内毒素测试，信息能够见于USP第161章“Transfusion and Infusion Assemblies and Similar Medical Devices”和ANSI/AAMI ST72“Bacterial endotoxins - Test methods, routine monitoring, and alternatives to batch testing”。这些标准和过程可一般称作药典（compendia）。

制药、医疗装置和食品工业的制造商必须满足某些标准，以确保其产品没有包含微生物或内毒素污染。这些工业要求对内毒素的存在的频繁、准确和灵敏测试，以满足各种安全标准，例如由美国食品和药物管理局或者环境保护局所规定的标准。这些机构接受药典过程标准中的许多。因此，如果制造商想要得到对新产品上市的政府批准，则在产品符合上述药典中的方法和标准时可满足FDA要求中的许多。这能够充分降低制造商得到新产品的FDA批准的成本。

当测试结果表明不良结果或者超出预计范围的内毒素浓度时，这些机构还具有严格报告要求。这种不合规结果必须彻底调查以查找根本原因，并且向监管机构说明。这是费时并且费用高的。如果制造商能够表明不合规结构因测试本身的异常而不是因样本中或样本上的内毒素的实际存在而发生，则可满足向机构的报告要求中的许多。这可减少满足这类报告义务所导致的时间和成本。当今，不存在能够区分测试本身的异常或误差与样本中的异常的已知方法或设备。