[发明专利]一种递送UL128复合体和预防CMV感染的MVA疫苗

说明书

在一个实施方案中本文提供了一种表达UL128复合体的表达系统。该表达系统可包括一种细菌人工染色体(BAC)构建体，其中所述BAC构建体包括插入一组编码UL128复合体的DNA序列的病毒载体。在另一个实施方案中提供了用于预防HCMV感染的疫苗组合物。该疫苗组合物可包括一种能够表达UL128复合体的病毒或细菌载体和一种药学可接受的载体、辅剂、添加剂或其组合或额外的表达蛋白质辅剂的载体。该病毒载体可以是MVA并且UL128复合体包括5种HCMV蛋白或其抗原片段：UL128、UL130、UL131A、gL和gH。在某些实施方案中，病毒载体进一步插入一种或多种额外的DNA序列，该序列编码了一种或多种额外的HCMVHCMV蛋白或其抗原片段，例如pp65、gB或两者均有，或例如gM/gN或gO。

政府权益声明

本发明是由(美国)国家过敏症和传染病研究所授予的批准号AI063356和(美国)国立癌症研究所授予的批准号CA030206在(美国)政府支持下完成的。美国政府享有本发明的一定权利。

优先权声明

本申请要求享有2012年7月27日提交的美国专利临时申请号61/676846的优先权益，在此通过引用引入其全文。

背景技术

巨细胞病毒(CMV)基因组很大(大于200kbp)，人类巨细胞(HCMV)编码大于等于165个开放阅读框架(ORF)，其编码的蛋白质使它能够感染多种细胞类型、建立潜伏期和从潜伏期重激活，并在免疫感受态宿主维持终生的持久性(Murphy等2003；Barry Chang 2007；Hansen等2003；Jarvis Nelson 2007；Rivailler等2006；Schleiss等2008；Oxford等2008)。60％以上的ORF对于纤维原细胞中的HCMV复制是非必要的(Dunn等2003；Yu等2003)，这表明大部分HCMV ORF的功能只能在非纤维原细胞的细胞中和/或在体内观察到。对HCMV的更广泛的理解应包括涉及ORF及其相关的非纤维原细胞的细胞类型、这些细胞在HCMV传播中起到的作用以及适当的动物模型的使用的研究。

内皮细胞和上皮细胞(合称，“Epi/EC”)是对于HCMV感染和传播重要的细胞类型。在从主要感染部位血原性传播之后，HCMV感染对于水平传播重要的组织的Epi/EC细胞，如肾、唾液和乳腺(Sinzger等2008)。多项研究已经报道，在原发性感染消退之后病毒仍可分泌于唾液和尿液中，并能分泌于连续的怀孕和哺乳期间的母乳中(Schleiss 2006a；Britt2008；Wang等2008；Mansat等1997；Stagno等1975)。在垂直传播期间，HCMV从子宫血管传播到细胞滋养层祖细胞，胎盘绒毛的Epi/EC是HCMV感染的第一类胚胎细胞(Maidji等2006；Maidji等2002)。因为Epi/EC同时在水平和垂直传播中起到重要作用，HCMV疫苗的保护效力很可能取决于成功生成对抗预防感染该种细胞类型的抗原性HCMV蛋白的高效价中和抗体(NAb)。

在没有起作用的免疫系统的个体中，如移植接受者、同时感染HIV的个体、或先天感染的胎儿/新生儿中，HCMV是发病率和死亡率的重要来源。目前，还没有已获得批准的疫苗来预防HCMV感染和/或疾病，然而，(美国)国家科学院医学研究所在2000年发布了一项报告，由于这种疫苗将带来的对人类健康的改善而将HCMV疫苗的研发放在了最高优先级类别中。因此，研发一种针对介导Epi/EC和纤维原细胞感染的病毒抗原(Ags)的疫苗将大有益处。

发明内容

在一个实施方案中，本文提供了一种用于表达UL128复合体(UL128C；其包括UL128、UL130、UL131A、糖蛋白H、糖蛋白L)的表达系统。该表达系统可以包括一种细菌人工染色体(BAC)构建体，其中该BAC构建体包括一种插入了一组编码UL128C的DNA序列的病毒载体。

在另一个实施方案中，提供了一种用于预防HCMV感染的疫苗组合物。该疫苗组合物可以包括一种能够表达UL128C的病毒载体，和一种药学可接受的载体、辅剂、添加剂或其组合。