[发明专利]同时验证在粪便中的生物标记物用于检测在胃肠道内，特别是肠内病理变化的检验试剂盒（组合快速检验）

说明书

发明领域

本发明涉及商业上可应用的、成本降低的、新型检验试剂盒（组合的快速检验盒）、体外医疗设备、侧流盒（lateral flow cassetee）、现场即时检验（point of care test）、组合的快速检验、生物测定、快速侧流测试条、平台，用于实施用于在人和/或动物的粪便中检测生物标记物的方法。所述检验试剂盒通过检测可以提供生理变化指示的生物标记物、特别是在胃肠道中恶性事件（食管、胃、小肠、胆管、胰腺和结肠）、特别是肠的肿瘤和肿瘤前体（息肉、腺瘤）的生物标记物，用于健康分析、早期检测和“结肠癌预防”。本发明更特别地涉及用于同时执行免疫层析检测方法的组合的快速检验和组合的快速检验盒和其组分以及需要的试剂。同时的（Synchronous）在语言学含义上是指“同步的”（“simultaneous”），但是同时的在技术含义上还指用于在快速检验盒中检测两种生物标记物肿瘤M2-PK和血红蛋白的活性配对（层析条件、膜、试剂、分配速率等，见描述）的共同的最优协调组合。

本发明进一步涉及评估检验和结果展示（使用交通灯颜色的“风险影响方案”）的更简单的方法。

将组合的快速检验用于在结肠癌筛选程序中的“预过滤”先证者（“pre-filtering” probands）。因为在先证者中实施非侵入性的组合的快速检验比执行侵入性的结肠镜检查导致显著地有更少的焦虑，该检验导致增加的结肠镜检查的参与。

发明背景

癌症，特别地结肠癌是在德国最常见的癌症（65,000例新病例，27,000例死亡）。在欧洲，每年有200,000人死于这种危险的疾病。由于结肠癌的起源方式，结肠癌疾病的结果可以通过成功的筛选，即前体（息肉/腺瘤）的检测和其移除，显著地最小化。

在德国每20分钟有一人死于结肠癌。结肠癌几乎总是从肠壁（intestinal lining） （黏膜）最初的良性生长发展。癌症缓慢地生长并且罹患的人长时间不会注意到它。通常地，症状只会在当肿瘤变大或已经转移时出现。如果未治疗，结肠癌随后通常在12个月内导致死亡。

因为它的起源方式，结肠癌的结果可以通过无症状的先证者的成功筛选几乎完全地预防。前体（息肉/腺瘤）可以通过筛选措施在早期检测到。结肠镜检查被视为结肠癌早期检测最好的方法（黄金标准）。结肠镜检查是只能由特别训练的医生（例如，胃肠病学家）执行的侵入式方法。该过程涉及风险（例如，穿孔、麻醉的风险）。预防性的结肠镜检查由医疗保险对年龄55岁和以上的人群覆盖。然而参与率只有2-3%，并且尽管进行了相当大的教育努力和市场推广，“美丽世界行动”（“glamour world actions”），参与率如今甚至在下降！除了其它之外，这一问题存在的理由是很多人发现检查的过程令人不愉快（心理抑制阈值）。

本发明的目的：

1. 降低心理抑制阈值。

2. 增加筛选结肠镜检查的参与率。

3. 校准（去除质量差异）。

4. 标准化。

5. 增加诊断准确性。

方案：

提供简单的、强劲的、廉价的、适合日常的侧流检验，其同样适合通过同时检测两种特异性生物标记物（M2-PK和血红蛋白），用于检测不正常的胃肠疾病，特别是结肠癌和它的前体。组合的快速检验是简单的并且可以容易地执行，适合用于减少鉴于筛选结肠镜检查的心理抑制阈值。只有一种生物标记物M2-PK和/或血红蛋白的阳性诊断会导致医生实施结肠镜检查用于进一步的诊断。会导致通过结肠镜检查的结肠癌和它的前体的更高的检测率，因为使用先前的组合的快速检验获得了先证者的预选。因为所述组合的快速检验同时测定结肠癌的两种重要生物标记物，该检验作为结肠镜检查前的双过滤器。

具有其前体的结肠癌（息肉-癌症序列）在肠（黏膜）内开始并且随后扩散至组织的其它区域（黏膜下层、肌层、浆膜）。越过黏膜边界的肿瘤生长称为早期或晚期的结肠癌。因为粪便与肠黏膜直接接触，生物标记物可以在胃肠道中作为病理变化的指示物比在血液中更早并且更特异地分析检测。因此，粪便样本比血液样本优选。只有当肿瘤到达黏膜下层时，早期生物标记物在血液中是可检测的。当这些标记物在血液中可检测时，它们是结肠癌和它的前体的“晚期”形式（“late”forms）。通常地，粪便中生物标记物的测定相比在血液中生物标记物的测定是有利地。越早检测到癌症和它的前体，越能更好的预后。初始的治疗（例如，治疗性结肠镜检查、“小的内脏”手术）导致早期结肠癌几乎100%的治愈。