[发明专利]包含CD95-Fc同种型的混合物的组合物

权利要求书

1.包含融合蛋白同种型的混合物的组合物，其中每个融合蛋白包含至少一个细胞外CD95结构域或其功能片段和至少一个Fc结构域或其功能片段，所述Fc结构域或其功能片段在4.0-8.5的pI范围之内分布。

2.根据权利要求1的组合物，其中所述Fc结构域为人的Fc结构域。

3.根据权利要求1或2的组合物，其中所述融合蛋白为APG101、与APG101具有至少70％同一性的多肽、和/或APG101的功能片段。

4.根据权利要求1-3中任一项的组合物，其中所述pI范围为4.5-7.8，优选地5.0-7.5。

5.根据权利要求1-4中任一项的组合物，其包含0.0-5.0摩尔％的融合蛋白高分子量形式，例如二聚体和/或聚集体。

6.根据权利要求1-5中任一项的组合物，其包含高数量的唾液酸。

7.根据权利要求3-6中任一项的组合物，其包含在N-末端处缩短的融合蛋白，例如-17、-21和/或-26融合蛋白。

8.根据权利要求1-7中任一项的组合物，其中所述Fc结构域或其功能片段是N-联糖基化的，特别是以高数量的岩藻糖基化形式为特征。

9.根据权利要求1-8中任一项的组合物，其包含在N-末端处经封阻的融合蛋白，例如通过pyro-Glu修饰进行封阻的融合蛋白，和/或包含具有游离的N-末端的融合蛋白。

10.根据权利要求1-9中任一项的组合物，其包含80-99摩尔％的在N-末端处经封阻的融合蛋白，和/或1-20摩尔％的具有游离的N-末端的融合蛋白。

11.制剂，其包含根据权利要求1-10中任一项的组合物。

12.根据权利要求11的制剂，其进一步包含：

(a)磷酸盐，优选地大约20mM至大约100mM的磷酸盐，更优选地大约50mM的磷酸盐，

(b)粘度增强剂，例如山梨糖醇，优选地大约0.1-10重量％的粘度增强剂，更优选地大约5重量％的粘度增强剂，和/或

(c)具有在4-8的范围内的pH值。

13.用于产生根据权利要求1-10中任一项的组合物的方法。

14.根据权利要求13的方法，其包括下列步骤：

(a)通过补料分批生产工艺来产生根据权利要求1-10中任一项的组合物，从而提供细胞收获物，和

(b)从所述细胞收获物中分离根据权利要求1-10中任一项的组合物。

15.根据权利要求13和14中任一项的方法，其中

步骤(a)包括给定的主要细胞批料的一系列培养步骤直至达到相关的收获参数，随后是细胞沉降和过滤出包含融合蛋白的上清液，和/或

步骤(b)包括捕获色谱法，病毒灭活，一系列阴离子和/或阳离子色谱法，病毒过滤，和/或调整至所希望的最终蛋白质浓度。