[发明专利]结合有细胞质转导肽及聚乙二醇的干扰素α融合蛋白

说明书

【技术领域】

本发明涉及细胞质转导肽(Cytoplasmic Transduction Peptide，CTP)和聚乙二醇一同结合于干扰素-α(interferon-α，IFNα)蛋白质的干扰素-α融合蛋白。

【背景技术】

干扰素用作肝炎治疗剂，并以干扰素-α制剂(Intron-A：Schering，Roferon-A：Roche)以及给药次数少于干扰素-α制剂的加入聚乙二醇的(PEGylated)IFN制剂(PEG-Intron：Schering，Pegasys：Roche)等方式销售。

作为干扰素-α治疗的初期副作用，具有发热、恶寒、全身无力、食欲不振、恶心及肌肉痛等，且这种症状在几乎所有患者中以与给药容量成正比的方式出现，而这种症状在治疗初期最为严重，只要中断治疗就会消失。并且，已知在肝炎患者中，PEG-干扰素-α治疗中的副作用的频率和严重程度与干扰素-α治疗相似(Kwan Sik Lee,Dong Joon Kim et al.Management of Chronic Hepatitis B,The Korean Journal of Hepatology.13:447-488,(2007))。

如上所述，随着基于干扰素的给药容量的副作用的传播，在使用干扰素作为治疗剂的过程中，为将副作用最小化需要减少给药量。

以往，为了解决如上所述的问题而提出过将细胞质转导肽(cytoplasmic transduction peptide，CTP)融合于干扰素，来改善干扰素的肝移动性，从而解决干扰素α的治疗副作用的方法。但将上述融合蛋白向小鼠模型给药时，由于初期活性急剧减少，使得活性在约6小时之后减少一半以上，因而改善融合蛋白的肝移动及残留特性的必要性随之出现。

本说明书全文中，参照了多篇专利文献，并表示了其引用。所引用的专利文献的公开内容全部插入于本说明书作为参照，从而更加明确说明本发明所属的技术领域的水平及本发明的内容。

【发明内容】

【技术问题】

本发明人致力于通过研发外源肽和聚乙二醇的结合之类的蛋白质变形，从而提高现有的干扰素的药剂学功效的干扰素-α融合蛋白。结果，通过实验证明了若通过接头在干扰素-α蛋白质的N末端结合细胞质转导肽，并通过接头在C末端结合聚乙二醇，则干扰素的固有活性得到较高的维持，生物体内的半衰期得到延长，且肝的移动能力得到提高，从而完成了本发明。

因此，本发明的目的在于，提供干扰素-α融合蛋白，上述干扰素-α融合蛋白通过改善以往的干扰素融合蛋白的肝移动及停留特性，最终能够期待干扰素给药量的减少。

本发明的再一目的在于，提供对上述干扰素-α融合蛋白进行编码的核酸分子。

本发明的另一目的在于，提供包含上述核酸分子的载体。

本发明的还一目的在于，提供包含上述载体的转化子。

本发明的又一目的在于，提供干扰素-α融合蛋白的制备方法。

本发明的又一目的在于，提供肝脏疾病的预防或治疗用药剂学组合物。

本发明的目的及优点借助以下的发明内容、发明要求保护范围及附图来更加明确。

【技术方案】

根据本发明的一实施方式，本发明提供干扰素-α融合蛋白，由CTP-X-IFNα-Y-PEG表示，上述干扰素-α融合蛋白的特征在于，上述CTP为细胞质转导肽(cytoplasmic transduction peptide)；上述X为由1-10个甘氨酸(glycine)组成的肽键；上述Y为1-100个半胱氨酸、甘氨酸或由甘氨酸及半胱氨酸组成的肽键；上述IFNα为干扰素-α2a或干扰素-α2b；上述PEG为聚乙二醇(polyethylene glycol)。

本发明人致力于通过研发外源肽和聚乙二醇的结合之类的蛋白质变形，从而提高现有的干扰素的药剂学功效的干扰素-α融合蛋白。通过本发明的一实施例，在向干扰素-α蛋白质和CTP之间导入接头之后，选择不改变干扰素-α蛋白质的结构的接头，并在上述融合蛋白的C-末端融合聚乙二醇之后，对此进行了活性分析。