[发明专利]细胞培养方法和系统

权利要求书

1.细胞培养方法，特征在于其在系统中实施，所述系统包括：

·至少一个适于培养细胞的设备(1)，所述设备(1)包括：

√至少一个生物反应器室(2)，其包括至少一个适于细胞培养的内表面(3、22、39)，

√流体入口-出口装置(13、14、15、17、18、19、23、24)，和

√与所述至少一个生物反应器室(2)连接的至少一个前室(4)，其包括用于引入细胞的入口(5)，

并且特征在于，其包括下列步骤：

a)在最初的物化条件下以预定量的液体用培养基填充所述前室(4)，

b)通过所述细胞入口(5)将细胞引入所述前室(4)，

c)使具有所述细胞的所述培养基从所述前室(4)传送至所述至少一个生物反应器室(2)，

d)使细胞沉降并且使它们静置预定的时间，直到它们附着到所述至少一个适于细胞培养的内表面(3、22、39)，所述内表面的物化性质使其以在一个或多个最初的物化条件下有利于细胞附着的方式起作用，

e)使培养基循环通过所述设备(1)和所述流体入口-出口装置(13、14、15、17、18、19、23、24)，

f)一旦获得细胞的目标数量或者在所述至少一个用于培养的生物反应器室(2、2’、2”)中达到临界密度，则将所述培养基的至少一个最初物化条件改变为更改的物化条件，在更改的物化条件下细胞附着被阻止，以便在更改的物化条件下使所述设备(1)内剩余的量位于已经用于细胞扩增的所述生物反应器室(2、2’、2”)，

g)将具有所述细胞的所述培养基传送至所述前室(4)，和

如果已经达到所述细胞的目标数量，则通过出口装置(24)将具有所述细胞的所述培养基取出，或者

如果没有达到所述细胞的目标数量，则将额外的培养基引入所述前室并从步骤c)开始重复所述步骤。

2.根据权利要求1所述的方法，特征在于所述至少一个被改变的最初物化条件为温度。

3.根据前述权利要求中任一项所述的方法，特征在于，其包括通过适于控制所述设备(1)中进行的所述细胞培养的至少一个控制单元(20)来自动控制所述细胞的数量和/或密度。

4.根据权利要求3所述的方法，特征在于控制所述细胞数量和/或密度是通过包括光学控制系统(21)的控制单元(20)和通过包括在所述设备中的透明表面(22)进行，所述细胞数量的控制包括步骤：

·一旦所述培养基已经被传送至所述至少一个生物反应器室(2)，则定位所述设备(1)以使具有所述细胞的所述培养基位于所述透明表面(22)上，并且该透明表面(22)反过来安置在用于控制所述细胞数量和/或密度的所述光学控制系统(21)上。

5.根据权利要求1-2和4中任一项所述的方法，特征在于，其包括通过与所述系统连接的灭菌系统(33)将所述系统灭菌的步骤。

6.根据权利要求4所述的方法，特征在于，其包括通过与所述系统连接的灭菌系统(33)将所述系统灭菌的步骤。

7.根据权利要求1-2和4中任一项所述的方法，特征在于前室(4)和所述至少一个生物反应器室(2、2’、2”)之间的传递是通过压力进行的，以使所述培养基通过多个阀(14、18、23)。

8.根据权利要求4所述的方法，特征在于前室(4)和所述至少一个生物反应器室(2、2’、2”)之间的传递是通过压力进行的，以使所述培养基通过多个阀(14、18、23)。

9.根据前述权利要求1-2和4中任一项所述的方法，特征在于，在通过所述流体入口-出口装置(24)将具有所述细胞的所述培养基取出之后，所述细胞通过以下从所述培养基分离：

·液体培养基，其包含在室(26)中，

·至少一个连接至所述室(26)的过滤系统(25)，其包括：

√液体培养基入口-出口装置(29)，

√培养基入口-出口装置(28、32)，

√至少一个过滤器(31)，

并且特征在于实施以下步骤：

·将具有所述细胞的所述培养基引入所述过滤系统(25)，

·用所述至少一个过滤器(31)保留所述细胞，

·通过所述液体培养基入口-出口装置(29)将液体培养基引入所述过滤系统(25)，

以使所述细胞从所述培养基分离。