[发明专利]阿洛酮糖差向异构酶及使用其的用于转变为阿洛酮糖的组合物

权利要求书

1.一种D-阿洛酮糖3-差向异构酶蛋白，其氨基酸序列为序列号1的氨基酸序列、或与所述序列号1的氨基酸序列有70％以上同源性的氨基酸序列，

具有与所述序列号1的氨基酸序列有70％以上同源性的氨基酸序列的蛋白质是氨基酸序列为序列号1的氨基酸序列的第229位氨基酸被谷氨酸取代的蛋白质、第264位氨基酸被天冬氨酸取代的蛋白质、或氨基酸序列的第229位氨基酸被谷氨酸取代且第264位氨基酸被天冬氨酸取代的蛋白质。

2.一种编码酶蛋白的基因，其为对序列号1的氨基酸序列、序列号2的氨基酸序列、序列号3的氨基酸序列或序列号4的氨基酸序列进行编码的基因。

3.如权利要求2所述的编码酶蛋白的基因，所述对序列号1的氨基酸序列进行编码的基因的碱基序列为序列号5的碱基序列，对序列号2的氨基酸序列进行编码的基因的碱基序列为序列号6的碱基序列，对序列号3的氨基酸序列进行编码的基因的碱基序列为序列号7的碱基序列，并且对序列号4的氨基酸序列进行编码的基因的碱基序列为序列号8的碱基序列。

4.一种重组表达载体，其包含对选自序列号1至序列号4中的任一氨基酸序列进行编码的碱基序列且具有图1的酶切图。

5.一种重组微生物，其由包含对序列号1至序列号4中任一氨基酸序列进行编码的碱基序列的重组表达载体转化，表达阿洛酮糖3-差向异构酶蛋白。

6.如权利要求5所述的重组微生物，所述表达载体具有图1的酶切图。

7.如权利要求6所述的重组微生物，所述微生物是大肠杆菌、芽孢杆菌属菌、棒状杆菌属菌或沙门氏菌属菌。

8.如权利要求6所述的重组微生物，所述微生物是大肠杆菌，其保藏号为KCCM 11295P。

9.一种用于生产阿洛酮糖的组合物，其包含权利要求1所述的酶蛋白、权利要求5至8中任一项所述的重组微生物、所述重组微生物的培养物或所述重组微生物的破碎物。

10.如权利要求9所述的用于生产阿洛酮糖的组合物，其进一步包含选自由锰和钴组成的组中的1种以上的金属离子。

11.一种从果糖生产阿洛酮糖的方法，其包括使权利要求9所述的用于生产阿洛酮糖的组合物与果糖反应的步骤。

12.如权利要求11所述的方法，所述果糖浓度为5～60％w/v。

13.如权利要求11所述的方法，所述与果糖反应的步骤在pH 6.0至9.0的条件下实现。

14.如权利要求11所述的方法，所述与果糖反应的步骤在50℃至65℃的温度条件下实现。

15.如权利要求11所述的方法，其通过所述与果糖反应的步骤，使果糖的第3个碳位差向异构化来使果糖转变为阿洛酮糖，得到所述阿洛酮糖。